как и с какой целью проводится определение чувствительности бактерий к бактериофагам
Какой бактериофаг поможет в лечении? Определит лабораторный анализ
Какой бактериофаг поможет в лечении? Определит лабораторный анализ
Б актериофаги – уникальные микроорганизмы. Их антибактериальная активность достигается внедрением в клетку возбудителя, последующим размножением и распадом бактерии. Для лечения бактериальных заболеваний могут применяться либо антибиотики, либо бактериофаги, либо проводят совместную терапию. В каких случаях необходимо назначать антибиотики, а когда – бактериофаги? Все ответы в нашей статье.
Зачем делать анализ
Одна из ключевых проблем, послужившая развитию антибиотикорезистентности бактерий, – неправильное применение антибиотиков или противомикробных препаратов.
Когда к врачу обращается пациент с острым течением заболевания, антибиотики в большинстве случаев назначают сразу, без предварительного определения чувствительности возбудителя.
Специалист назначает антибиотик исходя из собственного опыта, учитывая рекомендации по активности препарата в отношении бактерий, наиболее часто вызывающих данное заболевание. Выбор антибиотика зачастую продиктован клинической ситуацией: необходимо устранить острые симптомы воспаления, что возможно только при ликвидации микроорганизма как причины, его вызывающей. Одновременно с назначением антибиотика врач направляет на анализ по определению чувствительности возбудителя к антибактериальным препаратам и бактериофагам. Результаты анализа обычно готовы в течение 3–4-х дней.
Важные требования к подбору антибактериального препарата на первом этапе: правильная дозировка, узкий спектр активности. Корректное назначение антибиотика определяет возможность формирования к нему устойчивости у бактерий. К сожалению, часто случается наоборот: некорректно назначенный препарат катализирует процесс мутаций у бактерий и формирует устойчивость их к антибиотикам.
Бактериофаги в отличие от антибактериальных препаратов воздействуют только на возбудителя заболевания, не затрагивая нормальную флору человеческого организма. Препараты бактериофагов можно принимать в сочетании с другими антибактериальными средствами, что усиливает противобактериальный эффект и позволяет снизить дозу антибиотика.
Совместное назначение бактериофагов с противовирусными препаратами противопоказано.
Чтобы достичь нужного эффекта при лечении любым антибактериальным препаратом и препаратом бактериофага, необходимо пройти тест на чувствительность возбудителя.
Как проводят тест
Принцип определения чувствительности бактерий к антибиотикам и бактериофагам одинаковый. На первом этапе работают с бактериями, выделенными из патологического содержимого – раны, мочи, мазка со слизистой. Далее в питательную среду добавляют антибиотики разных групп и бактерии.
Антибиотикограмму – перечень антибактериальных препаратов, к которым чувствителен выделенный возбудитель, получают с помощью современных стандартизованных методов: серийных разведений или диффузионных методов (диско-диффузионных и Е-тестов).
Расшифровка результатов анализа
На бланке теста будут обозначения в виде букв R или S. R (Resistant) – резистентность бактерий к данному бактериофагу или антибиотику, S (Sensitive) – чувствительность возбудителя к препарату.
Тест на антибиотико- и фагочувствительность помогает определить, справится препарат с возбудителем инфекции или нет. Это важный показатель, на который ориентируются специалисты при выборе схемы лечения.
АО «НПО «Микроген» выпускает широкий спектр бактериофагов, что расширяет возможности фаготерапии и позволяет корректно подобрать препарат, к которому чувствительны патогенные бактерии.
Определение чувствительности к бактериофагам
Общая информация
Определение чувствительности к бактериофагам представляет собой микробиологическое исследование, которое направленно на обнаружение бактериофагов, к которым обладают чувствительностью патогенные бактериальные клетки. Бактериофаги, производятся фармакологической промышленностью в различных формах, жидких, таблетированных. Показанию к проведению этого лабораторного исследования является заболевания кишечника. Данный тест считается одним из дополнительных методов терапии кишечных инфекций, энтероколитов, гнойных ран, циститов и некоторых других инфекционных заболеваний.
Бактериофаги – это вирусы, которые избирательно поражают бактериальные клетки. При внедрении в бактериальную клетку бактериофаг вызывает лизис бактерий. Иными словами, бактериофаги – это специфическая живая лекарственная форма способная уничтожать определенные виды бактерий. В медицинской практике бактериофаги применяются в качестве дополнительного метода терапии некоторых инфекционных заболеваний вместе с антибиотиками.
Антибактериальный эффект препаратов бактериофагов основан на внедрении генома фага в бактериальную клетку с последующим его размножением и лизисом зараженной клетки. Вышедшие во внешнюю среду в результате лизиса бактериальной клетки бактериофагов способны повторно инфицировать и лизировать другие бактериальные клетки, так они действуют до полного уничтожения патогенных бактерий в воспалительном очаге.
В результате интенсивного развития химической промышленности, созданием и внедрением новых антибиотиков и антисептиков интерес к бактериофагам значительно снизился.
В наше время на фоне повышения резистентности к антибиотикам основных возбудителей инфекционных осложнений у пациентов хирургического и травматолого-ортопедического профиля, возникновением новых полирезистентных штаммов патогенных бактерий, поиск и создание новых высокоэффективных лекарственных средств, которые бы обладали высокой антибактериальной активностью продолжается.
В настоящее время имеются сведенья о использовании бактериофагов в терапии инфекционных заболеваний и осложнений различного генеза, а также различных хирургических инфекций.
Использование в лечении инфекционных заболеваний бактериофагов обладает рядом преимуществ:
бактериофаги демонстрируют высокую специфичность в терапии инфекционных заболеваний;
они не ингибируют развитие нормальной микрофлоры;
они не вызывают дисбаланс внутренней среды организма;
фаготерапия является этиотропной и обладает высокой специфичностью;
применение бактериофагов не имеют противопоказаний, что позволяет их использовать в терапии беременных и кормящих женщин, а также детей различного возраста, включая недоношенных;
бактериофаги могут использоваться не только в терапевтических, но и профилактических целях;
они не вызывают развития резистентности микроорганизмов;
они оказывают стимулирующего влияния на гуморальное и клеточное звенья иммунитета;
они не оказывают токсического воздействия, не провоцируют развитие аллергических реакций и не обладают тератогенным эффектом;
они демонстрируют высокую эффективность в монотерапии, но также могут применяться совместно с другими лекарственными средствами, например, антибиотиками и пробиотиками.
При использовании бактериофагов необходимо учитывать, что при отсутствии фагочувствительности к ним у выделенного микробного агента, возбудителя инфекционно-воспалительного процесса, это может способствовать усилению или развитию антибиотикорезистентности у возбудителя. Кроме этого, имеется риск развития реакции обострения Яриша–Гексгеймера, которая возникает на фоне высвобождения значительного количества токсинов, в случае массивной гибели микробов при внутривенном введении бактериофага.
Данное исследование направлено на определение чувствительность возбудителей инфекционных осложнений у пациентов после травм и оперативных вмешательств на опорно-двигательной системе к препаратам бактериофагов.
Показания
Определение чувствительности к бактериофагам представляет собой исследование, которое применяется при обнаружении лекарственно-устойчивых к широкому спектру антибактериальных препаратов форм патогенных и условно-патогенных бактерий.
Полученные результаты
По спектру действия различают моновалентные бактериофаги, лизирующие бактерии одного вида, и поливалентные – вызывающие лизинг бактерий нескольких видов.
В результатах определения чувствительности к бактериофагам обозначение S указывает на чувствительность микроорганизма к данному препарату, R – на резистентность.
Врач-консультант
Данное исследование может быть назначено инфекционистом, хирургом, врачом общей практики, травматологом.
Связанные болезни:
Где можно сдать анализ:
Симптомы
О чем говорят симптомы. Самодиагностика не рекомендована, однако достоверная информация помогает в принятии информированного решения.
Определение чувствительности к бактериофагам
Описание исследования
Бактериофаги – это вирусы, избирательное действие которых направлено против бактериальных клеток. В состав бактериофагов входят белковая оболочка и одно- или двухцепочной нуклеиновой кислоты, содержащей их генетический материал. Размножаясь внутри бактерий, они вызывают их лизис (растворение).
Анализ на чувствительность к бактериофагам проводится по назначению лечащего врача, как дополнительное исследование при проведении тестов:
400 «Дисбактериоз влагалища (слизистая влагалища)»;
403 «Посев на Mycoplasma hominis и Ureaplasma (идентификация агента и чувствительность к аб)»;
405 «Посев на Стрептококк (идентификация агента и чувствительность к аб»;
406 «Посев на Стрептококк (идентификация агента и чувствительность к аб»;
407 «Дисбактериоз кишечника»;
408 «Кал на стафилококк»;
411 «Посев на микрофлору (идентификация агента и чувствительность к аб)»;
412 «Посев грудного молока с идентификация агента (грудное молоко)»;
420 «Посев на патогенные энтеробактерии»;
421 «Микробиологический статус ротовой полости».
Подготовка к исследованию
Мероприятия по подготовке к проведению анализа см. в соответствующем разделе описания тестов, в рамках которых назначается определение чувствительности к бактериофагам.
Показания к исследованию
Цель проводимого обследования:
Интерпретация исследования
По результатам обследования на бланке лаборатории «Наука» выдается результат, содержащий информацию о выделенной патогенной культуре и ее чувствительности к бактериофагу. Пример приведен ниже:
Ф.И.О.: Иванов Сидор Петрович Пол: м Дата рождения: хх.хх.хххх
Дата исследования: хх.хх.хххх
Исследование
Результат
Нормы интерпретации
Примечание
[414] Определение чувствительности к бактериофагам
Дата выдачи (дата исследования): хх.хх.хххх
Посев на микрофлору и чувствительность микроорганизмов к фагам
Где проводится: Тонус
Срок выполнения: 5 рабочих дней
Для выполнения исследования на чувствительность к бактериофагам сначала выполняется микробиологический посев из интересующей локализации (мокрота, рана, ухо, нос, зев, кал итд.). Чувствительность к бактериофагам можно провести в том случае если в материале обнаружены те микроорганизмы к которым имеются соответствующие бактериофаги (стафилококки, стрептококки, энтерококки, дизентерийные бактерии, клебсиеллы, протей, сальмонеллы, синегнойная палочка).
Чувствительность к бактериофагам – микробиологическое исследование, направленное на выявление бактериофагов, к которым чувствительны патогенные бактериальные клетки.
Бактериофагами называют вирусы бактерий, которые способны проникать в клетку бактерий и уничтожать её (phagos – пожирать). При проникновении в бактериальную клетку бактериофаг приводит к лизису бактерий. Своего рода, бактериофаги — специфическая живая лекарственная форма против определенных видов бактерий. В медицине бактериофаги используют как один из дополнительных методов лечения некоторых инфекционных заболеваний совместно с антибиотиками. Например, для лечения заболеваний, вызванных патогенными микроорганизмами применяются соответствующие специфические бактериофаги: стафилококковый, стрептококковый, энтерококковый, колипротейный, специфический для дизентерийных бактерий (дизентерийный поливалентный против шигелл Флекснера и Зонне), клебсиелл, сальмонелл, синегнойной палочки. Бактериофаги производятся фармакологической промышленностью в различных формах (жидкие, таблетированные).
Исследование не следует проводить на фоне применения антибактериальных препаратов.
— один из дополнительных методов лечения гнойных ран, циститов, флегмон, маститов, дизентерии, энтероколитов, хронических остеомиелитов и ряда других инфекционных заболеваний.
— при выделении у пациента лекарственно-устойчивых микроорганизмов (особенно к антибактериальным препаратам широкого спектра действия),
Результаты определения чувствительности микроорганизмов к фагам:
Чувствительность микробиоты кишечника к бактериофагам и пробиотикам у детей с заболеваниями органов пищеварения
В современной детской гастроэнтерологии используется широкий арсенал препаратов для коррекции нарушенного микробиоценоза кишечника [1, 2]. В последние годы появились пациенты с антибиотикоассоциированными формами дисбактериоза (например, после проведения
В современной детской гастроэнтерологии используется широкий арсенал препаратов для коррекции нарушенного микробиоценоза кишечника [1, 2]. В последние годы появились пациенты с антибиотикоассоциированными формами дисбактериоза (например, после проведения тройной терапии по поводу хеликобактерной этиологии гастродуоденита) [3, 5].
В клинической практике педиатры и гастроэнтерологи для коррекции дисбактериоза всe чаще используют перспективные штаммы микробов в составе пробиотических препаратов [7, 8]. Штаммы должны быть типичными для данной возрастной группы детей, они должны сохранять длительную жизнеспособность при хранении и в процессе продвижения по желудочно-кишечному тракту. Одним из важнейших их свойств должна быть способность к адгезии на поверхности эпителиоцитов кишечника, что позволяет им колонизировать желудочно-кишечный тракт. Штаммы должны обладать высокой антагонистической активностью по отношению к патогенным организмам, обладать иммуномодулирующими свойствами [9]. При применении такой пробиотик не должен вызывать побочных эффектов и нарушений со стороны желудочно-кишечного тракта.
В современных условиях при широком арсенале пробиотиков чаще используются те препараты, которые рекомендованы хорошо обеспеченной рекламой от фирм-производителей или поставщиков. Долговременное использование одних и тех же пробиотиков и бактериофагов ведeт к изменению чувствительности условно-патогенных микроорганизмов [10, 11]. Отслеживание еe чувствительности в детской популяции является важной задачей клинической практики.
Цель исследования. Определить лабораторную чувствительность или резистентность микрофлоры кишечника у детей с гастроэнтерологической патологией и синдромом дисбактериоза к препаратам, назначаемым для его коррекции, прежде всего к антимикробным средствам, а также к бактериофагам и пробиотикам.
Материалы и методы. Под наблюдением находилось 65 детей в возрасте от 3 месяцев до 10 лет, из них от 3 месяцев до 3 лет — 10 детей, от 3 до 6 лет — 25 и 7–10 лет — 30. В младшей возрастной группе были больные с глистно-протозойной инвазией (15) и кожно-интестинальной аллергией (20). У детей 7–10 лет основным диагнозом был хронический гастродуоденит (ХГД) (поверхностный тип — у 20 больных, эрозивный — у 10). У всех детей с ХГД в течение последнего полугодия определялась Нр(+)-ассоциация, по поводу чего проводилась тройная антихеликобактерная терапия (Гастрозол, Амоксициллин, Клацид). На фоне тройной терапии больные получали пробиотическую поддержку (Бифиформ или Линекс).
В комплекс обследования включались оценка клинико-анамнестических данных, показателей клинического минимума (анализ крови, мочи, копрограммы), УЗИ органов брюшной полости, фиброгастродуоденоскопия (по показаниям). Всем больным с кожно-интестинальной аллергией проводилось биорезонансное тестирование на сенсибилизацию к пищевым и ингаляционным аллергенам. Исследование кала на лямблии проводилось методом эфирно-формалинового обогащения, микробиологический анализ кала на дисбактериоз кишечника с определением чувствительности выделенной флоры к четырем антимикробным препаратам (Метронидазол, Макмирор, Эрсефурил, Интетрикс), к шести видам бактериофагов (БФ) и 9 пробиотическим препаратам. Чувствительность или резистентность кишечной микрофлоры определялась к следующим фаголизатам: клебсиеллeзный поливалентный БФ, интести-БФ, колипротейный БФ (Н. Новгород), комплексный ПИО-БФ (Н. Новгород), ПИО-ПОЛИ БФ (Уфа) и Секстафаг (Пермь). Оценивалась также чувствительность кишечной микробиоты к 9 пробиотическим препаратам: Бифиформ, Линекс, Нормофлорин, Аципол, Лактобактерин, Бифидумбактерин, Ламинолакт, Пробифор, Примадофилус. При выделении дрожжеподобных грибов рода Candida albicans определялась чувствительность к антимикологическим средствам (Пимафуцин, Нистатин, Дифлюкан и др.).
Подготовка материала для бактериологического исследования проводилась с соблюдением следующих условий: взятие материала из утренней порции, доставка в лабораторию не позднее двух часов с момента дефекации. Бактериологические анализы с определением чувствительности выделяемых микроорганизмов из кишечника проводились в лаборатории «Диагностика» Института экспериментальной медицины (Санкт-Петербург).
Результаты. У всех обследованных детей в 100% случаев обнаруживались бактериологические признаки дисбактериоза. Для оценки тяжести дисбактериоза выделялись бактериологические признаки: снижение количества или исчезновение бифидофлоры, лактобактерий; снижение полноценной кишечной палочки; увеличение количества штаммов гемолитической кишечной палочки; изменение общего количества кишечной палочки; изменение количества энтерококков и наличие условно-патогенной флоры (энтеробактерий, кокков, дрожжеподобных грибов и др.) [12]. С учeтом числа выделенных бактериологических признаков и по соотношению в микробиологическом анализе анаэробы/аэробы у больных был диагностирован дисбиоз средней степени тяжести (71,5%) и I и III степени тяжести (25% и 8,5% соответственно). Степень тяжести дисбиоза является интегративным показателем, который характеризуется нарушением нормальных соотношений основных популяций микроорганизмов кишечника.
Что касается основных компонентов биоценоза, то следует отметить снижение титра бифидобактерий у 55,5% пациентов, нормальные показатели титра бифидобактерий были у 44,5%. Снижение же титра лактобактерий и колифлоры у обследованных детей было более значимым и выявилось у 82,2% и 93,5% соответственно. Нормальные показатели титров лактобактерий и колифлоры были у меньшего числа пациентов (у 17,8 и 4,5% соответственно). Не столь значительное снижение титра бифидобактерий обусловлено тем, что в недалeком прошлом у пациентов при проведении тройной антихеликобактерной терапии и назначении антипротозойной терапии использовался в комплексной терапии кислотоустойчивый штамм бифидобактерий БАГ 791. Однако общее содержание кишечной палочки и еe полноценных штаммов было значительно сниженным (у 95,5% и 80% детей соответственно). Только у 5% обследованных детей не было роста в бактериологическом анализе условно-патогенной флоры. Чаще всего определялся высев клостридий (33,8%), грибов рода C. albicans (20%), золотистого стафилококка (20%) и энтеробактерий — Klebsiella pneumoniae и K. oxytoca (17%), гемоштаммов Escherichia coli и Citrobacter spp. (14,3% и 5,7% пациентов). При анализе чувствительности выделенной микрофлоры к антимикробным препаратам, а именно к метронидазолу и нифуроксазиду (Эрсефурил), отмечена высокая степень резистентности (к метронидазолу 100% резистентность, к нифуроксазиду 85% пациентов). Следует отметить, что у наблюдаемых детей именно данные медикаменты использовались либо для санации от лямблиоза, либо для коррекции дисбактериоза, однако, используя их, санационного эффекта достигнуть не удавалось. Выделенная грамположительная и грамотрицательная микрофлора сохраняла 100% чувствительность к Макмирору и Интетриксу. Следовательно, эмпирический выбор антимикробных препаратов на этапе подавления микробной флоры при дисбактериозе без учeта лабораторной чувствительности не всегда позволяет получить положительный лечебный эффект.
Другая группа препаратов направленного действия — это БФ. Определение чувствительности микроорганизмов проводилось к шести разновидностям БФ. Наибольшая частота чувствительности условно-патогенных микроорганизмов выявилась к Секстафагу (Пермь) — 50% и Пиобактериофагу комплексному (Н. Новгород) — 43%. К остальным видам БФ: интести-БФ, колипротейному БФ (Н. Новгород), клебсиеллeзному и ПИО-ПОЛИ БФ (Уфа) чувствительность выделенных микроорганизмов в лабораторном тесте не превышала 25%, в то время как резистентность условно-патогенной флоры к различным видам БФ колебалась от 50% до 78%. Поэтому для коррекции дисбиоза применение БФ целесообразно использовать после определения чувствительности выделенной кишечной флоры к бактериофагам.
Ведущее значение в программах коррекции дисбактериоза у детей имеют пробиотики, они нередко назначаются как стартовые препараты в расчeте на их антагонистические свойства или на этапе восстановления микробиоценоза. Определение чувствительности микроорганизмов, выделяемых из кишечника при дисбактериозе у детей, проводимое лабораторным тестированием к пробиотикам, выявило интересные закономерности. Анализ полученных результатов исследований показал, что часто используемые препараты (Бифиформ, Линекс, Нормофлорин) утратили антагонистические свойства, определялась 100% резистентность условно-патогенных микроорганизмов к Бифиформу и Нормофлорину и в 95,5% случаев была резистентность к Линексу. Что касается чувствительности микробной флоры к Ациполу, Лактобактерину, Ламинолакту и Пробифору, то она колебалась от 68% до 86%. Самая высокая (100%) чувствительность условно-патогенных бактерий (грамположительных и грамотрицательных) выявилась к пробиотику Примадофилус; при сочетании в культуре бактериальных микроорганизмов с C. albicans у Примадофилуса определялась промежуточная чувствительность только к грибам.
Препарат Примадофилус в линейке пробиотиков, на наш взгляд является несомненным лидером. Во-первых, удобная порошковая форма, с хорошей переносимостью, достаточным количеством препарата в одной упаковке на полный курс лечения. Во-вторых, препарат обладает широким спектром действия и на грамположительную и грамотрицательную микрофлору, высокой (100%) чувствительностью условно-патогенной флоры к данному пробиотику и полным отсутствием аллергических реакций. Примадофилус содержит смесь лактобацилл (Lactobacillus acidophilus и L. rhamnosus) и бифидобактерий (Bifidobacterium infantis и B. longum), дополнительным компонентом служит мальтодекстрин, в составе нет лактозы, в отличие от большинства других препаратов. Синбиотик Примадофилус детский является препаратом выбора для коррекции микробиоты у детей с кожно-интестинальной аллергией.
Заключение. Определение чувствительности микроорганизмов при нарушенном микробиоценозе у детей позволяет оптимизировать коррекцию дисбактериоза как на этапе подавления условно-патогенной флоры, так и на последующих этапах восстановления микробиоты до нормобиоценоза. Выбор эффективных препаратов (антимикробных средств, бактериофагов, пробиотиков) позволяет сократить сроки коррекции нарушенного микробиоценоза и избежать возможных побочных их действий.
Синбиотик Примадофилус имеет преимущества в коррекции бактериальных ассоциаций в микробиоценозе по сравнению с Бифиформом, Линексом, Нормофлорином. При высеве грибов рода C. albicans до назначения Примадофилуса следует использовать антимикотические средства.
Литература
*СПбМАПО, **Лаборатория «Диагностика» ИЭМ, Санкт-Петербург
Контактная информация об авторах для переписки: Консультативно-диагностический центр для детей №2, Санкт-Петербург, ул. Гладкова, д. 4, 198099