что такое пыльцевая трубка
ПЫЛЬЦЕВАЯ ТРУБКА
Смотреть что такое «ПЫЛЬЦЕВАЯ ТРУБКА» в других словарях:
Пыльцевая трубка — * пылковая трубка * pollen tube вырост, образующийся при прорастании пыльцы на рыльце пестика (у высших растений) или в пыльцевой камере семязачатка (у голосеменных), по которому происходит перенос мужских гамет к семяпочке. Состоит из… … Генетика. Энциклопедический словарь
пыльцевая трубка — Вырост, образующийся при прорастании пыльцы (у высших растений на рыльце пестика, у голосеменных в пыльцевой камере семязачатка), по которому происходит перенос мужских гамет к семяпочке, и состоящий из протопласта сифоногенной клетки, покрытого… … Справочник технического переводчика
Пыльцевая трубка — … Википедия
пыльцевая трубка — ЭМБРИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ ПЫЛЬЦЕВАЯ ТРУБКА – трубка, по которой мужские гаметы попадают в семязачаток. Формируется после прорастания пыльцевого зерна … Общая эмбриология: Терминологический словарь
пыльцевая трубка — pollen tube пыльцевая трубка. Вырост, образующийся при прорастании пыльцы (у высших растений на рыльце пестика, у голосеменных в пыльцевой камере семязачатка), по которому происходит перенос мужских гамет к семяпочке, и состоящий из протопласта… … Молекулярная биология и генетика. Толковый словарь.
пыльцевая трубка — dulkiadaigis statusas T sritis augalininkystė apibrėžtis Siūliška, mezginės link tįstanti dygstančios žiedadulkės išauga, kuria vyriškosios gametos plaukia prie sėklapradžio. atitikmenys: angl. pollen tube rus. пыльцевая трубка … Žemės ūkio augalų selekcijos ir sėklininkystės terminų žodynas
пыльцевая трубка — трубка, образующаяся в результате разрастания сифоногенной клетки пыльцевого зерна. Доставляет к яйцеклетке спермии (у некоторых голосеменных – сперматозоиды), тем самым обеспечивая прохождение процесса оплодотворения у семенных растений … Анатомия и морфология растений
ПЫЛЬЦЕВАЯ ТРУБКА — трубка, вырастающая из пыльцевого зерна и проходящая к яйцеклетке зародышевого мешка, давая возможность мужским гаметам соединиться с женскими … Словарь ботанических терминов
Пыльцевая трубка — Когда пыльцевое зернышко попадает на рыльце пестика, пассивное передвижение его заканчивается, ему необходимо уже собственными силами доставить к яйцеклетке оплодотворяющие элементы. Не обладая органами движения, пыльцевое зернышко при помощи… … Энциклопедический словарь Ф.А. Брокгауза и И.А. Ефрона
Пыльцевая трубка — обычно трубчатый вырост пыльцевого зерна (См. Пыльцевое зерно), образующийся у семенных растений после опыления. На ранних стадиях развития представляет собой покрытое внутренней оболочкой (интиной) выпячивание протопласта пыльцевого… … Большая советская энциклопедия
Пыльцевая трубка
Пыльцевая трубка (лат. tubus pollinicus ) — трубчатый вырост, образующийся на пыльцевом зерне семенных растений при прорастании пыльцы.
Содержание
Морфология
Физиология
Классификация
В зависимости от того, каким образом пыльцевые трубки попадают в семязачаток — этот процесс подразделяется на следующие типы [2] :
Отличия у голосеменных
Примечания
Полезное
Смотреть что такое «Пыльцевая трубка» в других словарях:
Пыльцевая трубка — * пылковая трубка * pollen tube вырост, образующийся при прорастании пыльцы на рыльце пестика (у высших растений) или в пыльцевой камере семязачатка (у голосеменных), по которому происходит перенос мужских гамет к семяпочке. Состоит из… … Генетика. Энциклопедический словарь
ПЫЛЬЦЕВАЯ ТРУБКА — (tubus pollinicus), трубчатый вырост пыльцевого зерна семенных растений. Образуется при прорастании пыльцы путём выпячивания интины с протопластом вегетативной клетки через апертуру. У голосеменных П. т. образуется в пыльцевой камере семязачатка … Биологический энциклопедический словарь
пыльцевая трубка — Вырост, образующийся при прорастании пыльцы (у высших растений на рыльце пестика, у голосеменных в пыльцевой камере семязачатка), по которому происходит перенос мужских гамет к семяпочке, и состоящий из протопласта сифоногенной клетки, покрытого… … Справочник технического переводчика
пыльцевая трубка — ЭМБРИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ ПЫЛЬЦЕВАЯ ТРУБКА – трубка, по которой мужские гаметы попадают в семязачаток. Формируется после прорастания пыльцевого зерна … Общая эмбриология: Терминологический словарь
пыльцевая трубка — pollen tube пыльцевая трубка. Вырост, образующийся при прорастании пыльцы (у высших растений на рыльце пестика, у голосеменных в пыльцевой камере семязачатка), по которому происходит перенос мужских гамет к семяпочке, и состоящий из протопласта… … Молекулярная биология и генетика. Толковый словарь.
пыльцевая трубка — dulkiadaigis statusas T sritis augalininkystė apibrėžtis Siūliška, mezginės link tįstanti dygstančios žiedadulkės išauga, kuria vyriškosios gametos plaukia prie sėklapradžio. atitikmenys: angl. pollen tube rus. пыльцевая трубка … Žemės ūkio augalų selekcijos ir sėklininkystės terminų žodynas
пыльцевая трубка — трубка, образующаяся в результате разрастания сифоногенной клетки пыльцевого зерна. Доставляет к яйцеклетке спермии (у некоторых голосеменных – сперматозоиды), тем самым обеспечивая прохождение процесса оплодотворения у семенных растений … Анатомия и морфология растений
ПЫЛЬЦЕВАЯ ТРУБКА — трубка, вырастающая из пыльцевого зерна и проходящая к яйцеклетке зародышевого мешка, давая возможность мужским гаметам соединиться с женскими … Словарь ботанических терминов
Пыльцевая трубка — Когда пыльцевое зернышко попадает на рыльце пестика, пассивное передвижение его заканчивается, ему необходимо уже собственными силами доставить к яйцеклетке оплодотворяющие элементы. Не обладая органами движения, пыльцевое зернышко при помощи… … Энциклопедический словарь Ф.А. Брокгауза и И.А. Ефрона
Пыльцевая трубка — обычно трубчатый вырост пыльцевого зерна (См. Пыльцевое зерно), образующийся у семенных растений после опыления. На ранних стадиях развития представляет собой покрытое внутренней оболочкой (интиной) выпячивание протопласта пыльцевого… … Большая советская энциклопедия
Пыльцевая трубка
Смотреть что такое «Пыльцевая трубка» в других словарях:
Пыльцевая трубка — * пылковая трубка * pollen tube вырост, образующийся при прорастании пыльцы на рыльце пестика (у высших растений) или в пыльцевой камере семязачатка (у голосеменных), по которому происходит перенос мужских гамет к семяпочке. Состоит из… … Генетика. Энциклопедический словарь
ПЫЛЬЦЕВАЯ ТРУБКА — (tubus pollinicus), трубчатый вырост пыльцевого зерна семенных растений. Образуется при прорастании пыльцы путём выпячивания интины с протопластом вегетативной клетки через апертуру. У голосеменных П. т. образуется в пыльцевой камере семязачатка … Биологический энциклопедический словарь
пыльцевая трубка — Вырост, образующийся при прорастании пыльцы (у высших растений на рыльце пестика, у голосеменных в пыльцевой камере семязачатка), по которому происходит перенос мужских гамет к семяпочке, и состоящий из протопласта сифоногенной клетки, покрытого… … Справочник технического переводчика
Пыльцевая трубка — … Википедия
пыльцевая трубка — ЭМБРИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ ПЫЛЬЦЕВАЯ ТРУБКА – трубка, по которой мужские гаметы попадают в семязачаток. Формируется после прорастания пыльцевого зерна … Общая эмбриология: Терминологический словарь
пыльцевая трубка — pollen tube пыльцевая трубка. Вырост, образующийся при прорастании пыльцы (у высших растений на рыльце пестика, у голосеменных в пыльцевой камере семязачатка), по которому происходит перенос мужских гамет к семяпочке, и состоящий из протопласта… … Молекулярная биология и генетика. Толковый словарь.
пыльцевая трубка — dulkiadaigis statusas T sritis augalininkystė apibrėžtis Siūliška, mezginės link tįstanti dygstančios žiedadulkės išauga, kuria vyriškosios gametos plaukia prie sėklapradžio. atitikmenys: angl. pollen tube rus. пыльцевая трубка … Žemės ūkio augalų selekcijos ir sėklininkystės terminų žodynas
пыльцевая трубка — трубка, образующаяся в результате разрастания сифоногенной клетки пыльцевого зерна. Доставляет к яйцеклетке спермии (у некоторых голосеменных – сперматозоиды), тем самым обеспечивая прохождение процесса оплодотворения у семенных растений … Анатомия и морфология растений
ПЫЛЬЦЕВАЯ ТРУБКА — трубка, вырастающая из пыльцевого зерна и проходящая к яйцеклетке зародышевого мешка, давая возможность мужским гаметам соединиться с женскими … Словарь ботанических терминов
Пыльцевая трубка — Когда пыльцевое зернышко попадает на рыльце пестика, пассивное передвижение его заканчивается, ему необходимо уже собственными силами доставить к яйцеклетке оплодотворяющие элементы. Не обладая органами движения, пыльцевое зернышко при помощи… … Энциклопедический словарь Ф.А. Брокгауза и И.А. Ефрона
Пыльцевая трубка
Смотреть что такое «Пыльцевая трубка» в других словарях:
Пыльцевая трубка — * пылковая трубка * pollen tube вырост, образующийся при прорастании пыльцы на рыльце пестика (у высших растений) или в пыльцевой камере семязачатка (у голосеменных), по которому происходит перенос мужских гамет к семяпочке. Состоит из… … Генетика. Энциклопедический словарь
ПЫЛЬЦЕВАЯ ТРУБКА — (tubus pollinicus), трубчатый вырост пыльцевого зерна семенных растений. Образуется при прорастании пыльцы путём выпячивания интины с протопластом вегетативной клетки через апертуру. У голосеменных П. т. образуется в пыльцевой камере семязачатка … Биологический энциклопедический словарь
пыльцевая трубка — Вырост, образующийся при прорастании пыльцы (у высших растений на рыльце пестика, у голосеменных в пыльцевой камере семязачатка), по которому происходит перенос мужских гамет к семяпочке, и состоящий из протопласта сифоногенной клетки, покрытого… … Справочник технического переводчика
Пыльцевая трубка — … Википедия
пыльцевая трубка — ЭМБРИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ ПЫЛЬЦЕВАЯ ТРУБКА – трубка, по которой мужские гаметы попадают в семязачаток. Формируется после прорастания пыльцевого зерна … Общая эмбриология: Терминологический словарь
пыльцевая трубка — pollen tube пыльцевая трубка. Вырост, образующийся при прорастании пыльцы (у высших растений на рыльце пестика, у голосеменных в пыльцевой камере семязачатка), по которому происходит перенос мужских гамет к семяпочке, и состоящий из протопласта… … Молекулярная биология и генетика. Толковый словарь.
пыльцевая трубка — dulkiadaigis statusas T sritis augalininkystė apibrėžtis Siūliška, mezginės link tįstanti dygstančios žiedadulkės išauga, kuria vyriškosios gametos plaukia prie sėklapradžio. atitikmenys: angl. pollen tube rus. пыльцевая трубка … Žemės ūkio augalų selekcijos ir sėklininkystės terminų žodynas
пыльцевая трубка — трубка, образующаяся в результате разрастания сифоногенной клетки пыльцевого зерна. Доставляет к яйцеклетке спермии (у некоторых голосеменных – сперматозоиды), тем самым обеспечивая прохождение процесса оплодотворения у семенных растений … Анатомия и морфология растений
ПЫЛЬЦЕВАЯ ТРУБКА — трубка, вырастающая из пыльцевого зерна и проходящая к яйцеклетке зародышевого мешка, давая возможность мужским гаметам соединиться с женскими … Словарь ботанических терминов
Пыльцевая трубка — обычно трубчатый вырост пыльцевого зерна (См. Пыльцевое зерно), образующийся у семенных растений после опыления. На ранних стадиях развития представляет собой покрытое внутренней оболочкой (интиной) выпячивание протопласта пыльцевого… … Большая советская энциклопедия
Пыльцевые трубки были впервые обнаружены Джованни Баттиста Амичи в 19 веке.
Они используются в качестве модели для понимания поведения растительных клеток. Продолжаются исследования, чтобы понять, как пыльцевая трубка реагирует на внеклеточные управляющие сигналы для достижения оплодотворения.
СОДЕРЖАНИЕ
Описание
Покрытосеменные
Голосеменные
Механизм роста пыльцевой трубки
Признание
Самка спорофита должна распознать пыльцу, прилипшую к рыльцу. Часто может успешно расти только пыльца одного вида. Разросшаяся пыльца растет более успешно. При использовании самонесовместимых систем пыльца разрастается и вытесняет собственную пыльцу. Взаимодействие между стилем и пыльцой определяет совместимость и влияет на скорость роста пыльцевой трубки. Этот процесс отбора основывается на регуляции на уровне генов, в которых локусы генов гинеция позволяют либо собственной пыльце медленно расти, либо прекращать рост, либо взрываться, в то время как происходит более быстрый рост перешедшей пыльцы. Системы самонесовместимости поддерживают генетическое разнообразие. Что касается голосеменных, то они не содержат пестика с рыльцем. Следовательно, пыльца должна погрузиться в каплю опыления, перенося мужской гаметофит в яйцо обнаженной семяпочки. Однако пыльца разных видов не погрузится в каплю; пыльца остается плавающей сверху, а капля втягивается обратно в микропиле.
Посвящение
Как только пыльцевое зерно распознано и гидратировано, пыльцевое зерно прорастает и вырастает пыльцевая трубка. На этом этапе существует конкуренция, поскольку многие пыльцевые зерна могут конкурировать, чтобы добраться до яйца. Клеймо играет роль в направлении сперматозоидов к восприимчивой яйцеклетке в случае многих яйцеклеток. Только совместимые пыльцевые зерна могут расти, как это определено сигналом с помощью рыльца.
В пыльцевом зерне генеративная клетка дает начало сперматозоиду, тогда как вегетативные клетки имеют трубочную клетку, которая вырастает пыльцевую трубку. У некоторых растений есть механизмы для предотвращения самоопыления, например, стигма и пыльники созревают в разное время или имеют разную длину, что значительно способствует увеличению генетического разнообразия следующего поколения.
Скорость роста пыльцевых трубок сильно различается, и многие исследования сосредоточены на передаче сигналов. Экспрессия гена в пыльцевом зерне была идентифицирована как экспрессия гаметофита, а не родительского спорофита, поскольку он экспрессирует свою собственную уникальную мРНК и ферменты. У персикового дерева окружающая среда, через которую прорастает пыльцевая трубка, обеспечивает питание для роста трубки до семяпочки. Пыльцевые трубки толерантны, и даже на пыльце, поврежденной рентгеновскими и гамма-лучами, могут расти пыльцевые трубки.
Рост и сигнализация
На рост пыльцевой трубки влияет взаимодействие между стигмой и пыльцевым зерном. Удлинение трубки достигается за счет удлинения цитоскелета, и он отходит от кончика, что регулируется высоким уровнем кальция в цитозоле. Уровни кальция помогают синаптическим пузырькам в мембранах расти и расширяться на кончике. Полипептиды, обнаруженные в этом стиле, также регулируют рост пробирки, и были идентифицированы специфические пептиды, которые играют роль в передаче сигналов для роста.
Кальций и этилен у Arabidopsis thaliana участвуют в окончании пыльцевой трубки, когда она растет рядом с яичником. Увеличение кальция позволило высвободить две сперматозоиды из трубки, а также вызвать дегенерацию синергидной клетки. Химический градиент кальция также может способствовать прекращению роста пробирки на ранней стадии или в подходящее время.
Длина пыльцевой трубки зависит от вида. Он растет колебательно, пока не будет готов выпустить сперму рядом с яйцеклеткой для оплодотворения. Некоторые быстрорастущие пыльцевые трубки были обнаружены у лилий, табака и Impatiens sultanii. Скорость роста дает организму преимущество, но неясно, существует ли вариация скорости роста в популяции или она выбиралась на протяжении поколений из-за повышенной приспособленности.
Эволюция
В других типах голосеменных, хвойных и гнетофитных сперматозоиды неподвижны, что называется сифоногамией, и пыльцевая трубка прорастает через архегонии, помогая сперматозоидам более непосредственно достигать яйцеклетки. Хвойные деревья могут быть разветвленными или неразветвленными, и они вызывают дегенерацию женской ткани, поскольку она прорастает через большее количество тканей. Сосны, например, выделяют цитоплазму сперматозоидов, и слияние одной спермы происходит по мере того, как другая сперма дегенерирует. Тем не менее, у gnetophyta есть особенности, более похожие на пыльцевые трубки покрытосеменных, где трубка достигает яйца с ранней формой двойного оплодотворения. Однако эндосперм не образуется, и второе оплодотворение прерывается.
Поведение
Роль актинового цитоскелета
Динамика актинового филамента
Эксперименты по динамике актиновых филаментов в области голени также проводились с использованием GFP. Результаты показали, что максимальная длина филамента в этой области значительно увеличилась, а частота разрыва значительно снизилась. Такие находки указывают на то, что актиновые филаменты, расположенные в области голени, относительно стабильны по сравнению с актиновыми филаментами, расположенными в апикальной и субапикальной областях.
Регулирование
АД регулируют организацию и динамику актинового цитоскелета. Как указывалось ранее, актиновые филаменты непрерывно синтезируются из апикальной мембраны. Это указывает на присутствие заякоренных в мембране факторов нуклеации актина. Экспериментально было выдвинуто предположение, что формины являются репрезентативными для таких факторов нуклеации актина. Например, формин AtFH5 был идентифицирован как главный регулятор зародышеобразования актиновых филаментов, особенно для актиновых филаментов, синтезируемых из апикальной мембраны пыльцевой трубки. Генетические нокауты AtFH5 приводят к уменьшению количества актиновых филаментов как в апикальных, так и в субапикальных областях пыльцевой трубки, тем самым обеспечивая больше доказательств в поддержку теории, что AtFH5 нуклеирует сборку актиновых филаментов в апикальных и субапикальных областях пыльцевой трубки.
Руководство
Ремонт ДНК
Организация RMD Actin Filament вносит свой вклад в рост пыльцевых трубок
Обзор
Для успешного оплодотворения происходит быстрый рост кончиков пыльцевых трубок, которые доставляют мужские гаметы в семяпочки. Пыльцевая трубка состоит из трех различных областей: вершины, которая является областью роста, суб вершины, которая является переходной областью, и стержня, который действует как нормальные растительные клетки со специфическими органеллами. В области верхушки происходит рост кончика, требующий слияния секреторных пузырьков. Внутри этих пузырьков в основном находятся пектин и гомогалактуронаны (часть клеточной стенки на кончике пыльцевой трубки). Гомогалактуронаны накапливаются в области верхушки посредством экзоцитоза, чтобы ослабить клеточную стенку. Образуется более толстая и мягкая стенка наконечника с более низким пределом текучести при напряжении, что позволяет происходить расширению ячеек, что приводит к увеличению роста наконечника. Обратный фонтан цитоплазматического потока происходит во время роста кончика, который необходим для расширения клеток, поскольку он транспортирует органеллы и везикулы между областью голени и субапексной областью.
Актиновый цитоскелет является важным фактором роста пыльцевой трубки, потому что существуют разные паттерны актинового цитоскелета в разных областях пыльцевой трубки для поддержания роста поляризованных клеток. Например, есть продольные актиновые кабели в области голени, чтобы регулировать обратный фонтан цитоплазматического потока. F-актин контролирует накопление полных везикул homogalacturonans, по существу, опосредующих рост кончиков в субапексной области. Актиновые филаменты контролируют взаимодействия апикальной мембраны и цитоплазмы, в то время как пыльцевая трубка растет в области верхушки. F-актин из апикальной мембраны вырабатывает связывающий актин белок, называемый формин, который необходим для роста кончика пыльцевой трубки. Формины экспрессируются в ростовых клетках кончика и делятся на две подгруппы: тип I и тип II. Формины типа I образуют структуры актина и участвуют в цитокинезе. Формины типа II, с другой стороны, способствуют росту поляризованных клеток, что необходимо для роста кончиков. Рост кончика является формой чрезвычайно поляризованного роста, и этот поляризованный процесс требует организации актинового цитоскелета, опосредованной актин-связывающим белком. Существенным белком, необходимым для этого роста кончиков, является белок, организующий актин, и белок-формин типа II, называемый детерминантом морфологии риса (RMD). RMD локализован на кончике пыльцевой трубки и контролирует рост пыльцевой трубки, регулируя полярность и организацию массива F-актина.
RMD способствует росту пыльцевых трубок
RMD способствует прорастанию пыльцы и росту пыльцевых трубок, и это доказано многочисленными экспериментами. В первом эксперименте сравниваются характеристики пестика и стигмы мутанта rmd-1 (растение риса без функциональной RMD) и растения риса дикого типа (с функциональной RMD). Пыльник и пестик были короче у мутантов rmd-1, чем у дикого типа. Этот эксперимент показал, что RMD имеет решающее значение для развития пыльцы. У растений риса дикого типа скорость прорастания увеличилась, в то время как у мутантов rmd-1 скорость прорастания снизилась. Это было замечено, когда оба были проращены в жидкой среде для проращивания. После проверки всхожести было проведено сравнение длины и ширины пыльцевых трубок двух растений. Пыльцевые трубки растений дикого типа имели большую длину пыльцевых трубок, чем мутанты, но мутанты имели большую ширину трубки. Эта большая ширина пыльцевой трубки у мутантов указывает на уменьшение роста поляризованных клеток и, следовательно, на уменьшение роста кончиков. Затем собирали пыльцевые зерна дикого типа и мутантов для сравнения активности опыления между дикими типами и мутантами. У мутантов наблюдалась пониженная активность и минимальное проникновение, тогда как у диких типов повышалась активность и проникновение через стиль и до дна пестиков. Эти наблюдения указывают на задержку роста пыльцевых трубок у мутантов rmd-1. Кроме того, не было никакого влияния на скорость оплодотворения между диким типом и мутантом, и это было проверено путем измерения скорости завязывания семян между диким типом и мутантом. Было обнаружено, что у обоих были одинаковые нормы заложения семян. Следовательно, RMD не влияет на оплодотворение и влияет только на рост кончиков.
Экспрессия RMD в пыльцевой трубке
Экстракции тотальной РНК из цельного цветка, чешуи, палеи, лодикулы, пестика, пыльника и зрелых пыльцевых зерен растений дикого типа проводились для того, чтобы обнаружить, где RMD специфически экспрессируется в растении в целом. Используя RT-qPCR (количественная ПЦР с обратной транскрипцией), было очевидно, что в каждой части растения были разные количества транскриптов RMD. И затем стало очевидно, где RMD присутствует в каждой части растения, с использованием RT-PCR (ПЦР с обратной транскрипцией) и использования UBIQUITIN в качестве контроля. Эти два метода продемонстрировали обильное присутствие транскриптов RMD в лемме, пестике, пыльнике и зрелых пыльцевых зернах. Для подтверждения этих результатов был использован другой метод. В этом методе использовались трансгенные растения, в которых промоторная область RMD слита с репортерным геном, кодирующим GUS. Затем гистохимическое окрашивание тканей этих трансгенных растений показало высокую активность GUS в пестике, стенке пыльника и зрелых пыльцевых зернах. Таким образом, эти комбинированные результаты продемонстрировали, что RMD экспрессируется в этих конкретных органах растения.
Обнаружение сигналов GUS было использовано еще раз, чтобы изучить, где RMD специфически экспрессируется в пыльцевой трубке. Во-первых, пыльцевые зерна были собраны с трансгенных растений proRMD :: GUS, и было отмечено, что в этих зрелых пыльцевых зернах был сильный сигнал GUS. Эти пыльцевые зерна затем проращивали in vitro, и сигналы GUS наблюдались внутри кончика пыльцевых трубок. Однако сила этих сигналов GUS варьировалась на разных стадиях прорастания. Сигналы GUS были слабыми на кончике пыльцевой трубки на ранней стадии прорастания, но сильнее на более поздних стадиях прорастания. Таким образом, эти результаты подтверждают, что RMD участвует в прорастании пыльцы и росте пыльцевых трубок.
Локализация RMD в пыльцевой трубке
Чтобы выяснить, отвечает ли PTEN-подобный домен за локализацию RMD, было проведено сравнение конфокальных изображений GFP, слитого с доменом PTEN, и укороченного RMD без домена PTEN (pLat52 :: FH1FH2-eGFP). Сигналы PTEN-eGFP были локализованы на кончике пыльцевых трубок, как сигналы RMD-eGFP, тогда как сигналы FH1FH2-eGFP присутствовали по всей пыльцевой трубке и не были локализованы полярным образом. Следовательно, эти объединенные результаты демонстрируют, что PTEN-подобный домен отвечает за локализацию кончика RMD в пыльцевых трубках.
RMD контролирует распределение и полярность F-актина в пыльцевой трубке
Чтобы определить, контролирует ли RMD организацию F-актина в пыльцевой трубке, наблюдали массивы F-актина в зрелых пыльцевых зернах дикого типа и rmd-1 с помощью окрашивания Alexa Fluor 488-фаллоидином. Сильно связанные актиновые филаменты присутствовали вокруг отверстий пыльцевых зерен дикого типа, хотя не было накопления актиновых волокон вокруг отверстий в пыльцевых зернах rmd-1. Кроме того, наблюдались слабые сигналы и случайная организация актиновых филаментов внутри пыльцевого зерна rmd-1. Таким образом, эти результаты подтверждают, что RMD важен для контроля прорастания пыльцы.
Интенсивность флуоресценции измеряли с помощью статистического анализа, чтобы наблюдать за плотностью актиновых волокон в пыльцевых трубках. Была большая интенсивность флуоресценции в области стержня пробирок с rmd-мутантом, что означает, что в этой области была более высокая плотность F-актина. Но наблюдалась более низкая плотность F-актина в области кончика пробирок с rmd-мутантом по сравнению с пробирками дикого типа. Это демонстрирует, что картина распределения F-актина в пыльцевых трубках изменяется без функционального RMD.
Чтобы определить полярность актиновых кабелей, измеряли углы между актиновыми кабелями и осью удлинения пыльцевой трубки. Углы в области стержня пыльцевых трубок дикого типа были преимущественно менее 20 °, тогда как углы для пыльцевых трубок с мутантным rmd были больше 60 °. Эти результаты подтверждают тот факт, что RMD важен для роста поляризованных кончиков, потому что rmd-мутантные пыльцевые трубки (без функционального RMD) демонстрируют увеличенную ширину и, следовательно, уменьшение роста кончиков. Максимальная длина отдельных кабелей нитей F-актина от апикальной области до стержня удлиненных пыльцевых трубок также была измерена для проверки полярности внутри пыльцевой трубки. Максимальная длина кабелей F-актина была короче в пыльцевых трубках rmd-мутантов по сравнению с таковыми в трубках дикого типа. Следовательно, эти комбинированные результаты подтверждают, что правильная организация актиновых кабелей, а также нормальная плотность F-актина внутри кончика трубки может быть достигнута только при наличии RMD.