что делают в биохимической лаборатории
Структура биохимической лаборатории, особенности работы лаборатории
По учебнику Г.Г. Арунянц изучите основные принципы создания, электронной таблицы, ввода формул в MC Excel 2003
10. Перечень учебной литературы к занятию:
«ИНФОРМАТИКА практический курс для студентов медицинских вузов».Владикавказ, 2005 г.
2. Есауленко И.Э., Семенов С.Н. Основы практической информатики в медицине; Воронеж, 2005.
Правила взятия капиллярной крови
Наборы готовят заранее и стерилизуют в сухожаровом шкафу при температуре 180ºС в течение 1 часа. Повторное использование капилляра для других больных без дезинфекции и стерилизации недопустимо!
Алгоритм взятия капиллярной крови:
Структура биохимической лаборатории, особенности работы лаборатории
Форма одежды сотрудника лаборатории: халат или костюм, шапочка, медицинские перчатки соответствующего размера, сменная обувь, маска, очки.
Сыворотка крови — это плазма, лишенная фибриногена. Сыворотку получают из венозной крови. Для этого кровь набирают в сухую пробирку, где она сворачивается при комнатной температуре в течение 5-11 минут и при дальнейшем стоянии расслаивается. В верхней части пробирки остается соломенно-желтая сыворотка, в нижней — фибриногенный сгусток с форменными элементами.
Для получения плазмы крови необходимо предотвратить процесс свертывания крови, поэтому в пробирку добавляют антикоагулянт. Если кровь используется для работы с форменными элементами добавляют гепарин, для исследования системы гемостаза — цитрат натрия или оксалат натрия.
Алгоритм взятия крови из вены:
Можно собирать кровь в пробирку непосредственно из иглы, введенной в вену под углом 15-18 градусов или с помощью вакутейнера.
При взятии крови из вены необходимо помнить:
Для хранения кровь центрифугируют, полученную сыворотку снимают в чистые сухие пробирки. Нельзя хранить сыворотку на сгустке.
Общие правила работы в лаборатории
Перед началом работы в биохимической лаборатории необходимо ознакомиться с правилами техники безопасности.
Каждый работающий в лаборатории обязан содержать свое рабочее место в чистоте и порядке. Работать в лаборатории можно только в халатах.
Работайте тщательно, аккуратно, без лишней торопливости; соблюдайте в лаборатории тишину.
Не загромождайте рабочее место портфелями, свертками, сумками и т.п.
Приступая к работе, необходимо ознакомиться с устройством приборов и аппаратов, их принципом действия.
Прежде чем приступить к лабораторной работе по данной теме, тщательно изучите ее описание; подготовьте необходимые приборы и реактивы.
Внимательно наблюдайте за ходом опыта, отмечая каждую его особенность (выпадение и растворение осадков, изменение окраски, температуры и т.д.). В ходе эксперимента аккуратно ведите записи в рабочем журнале.
Без указания преподавателя не проводите никаких дополнительных опытов.
Не переносите приборы и реактивы общего пользования.
Будьте осторожны при работе с электронагревательными приборами, не оставляйте их без присмотра.
Не принимайте в лаборатории пищу.
Категорически запрещается использовать посуду, имеющую трещины или отбитые края.
После окончания работы вымойте использованную посуду. Мытье производят водой, мыльными и слабощелочными растворами Мытье хромовой смесью и органическими растворителями может быть рекомендовано в исключительных случаях для очистки нерастворимых в воде веществ. Эта работа производится в резиновых перчатках, фартуке и очках.
После окончания работы выключите воду, электронагревательные приборы и установки. Приведенное в порядок рабочее место сдайте дежурному лаборанту.
Правила работы с реактивами:
Все флаконы с реактивами в лаборатории должны иметь соответствующие этикетки. После использования раствора флаконы сразу закрываются пробками, которые нельзя путать. Категорически запрещается ставить их на книги и тетради.
Не расходуйте реактивы больше требуемого количества.
Нельзя брать химические вещества руками и пробовать на вкус. Нюхать вещества следует, не вдыхая пары полном грудью, а направляя их к себе движением ладони.
Работы с вредными веществами проводить только в вытяжном шкафу.
Концентрированные кислоты и щелочи наливать осторожно в вытяжным шкафом; не уносить их на свое рабочее место.
Щелочи, кислоты и другие ядовитые вещества необходимо набирать в пипетку только при помощи резиновой груши или шприца.
Разбавление кислот, особенно серной, производят путем осторожного приливания кислоты тонкой струйкой по стеклянной палочке в холодную воду при непрерывном помешивании.
При составлении смеси кислот следует приливать кислоту с большим удельной плотность к кислоте с меньшей удельной плотностью.
Растворение щелочей следует проводить в фарфоровой или пластиковой посуде в вытяжном шкафу на поддоне. Куски щелочи запрещается брать руками. Растворение необходимо проводить небольшими порциями при перемешивании.
При нагревании жидкости пробирку следует держать отверстием в сторону от себя и от людей, находящихся рядом.
Запрещается производить какие–нибудь работы с легковоспламеняющимися веществами вблизи открытого огня.
Следует проявлять осторожность при нагревании жидкости, не допуская ее разбрызгивания.
При взбалтывании растворов в колбах или пробирках необходимо их закрыть пробкой.
При несчастных случаях немедленно заявляйте дежурному лаборанту или преподавателю. В лаборатории имеется медицинская аптечка с необходимыми медикаментами для оказания экстренной помощи.
Правила работы с оборудованием:
Центрифуги
Перед центрифугированием центрифужные пробирки уравновешивают и располагают в центрифуге симметрично.
Необходимо, чтобы центрифужная камера была закрыта крышкой.
Во время работы центрифуги запрещается открывать крышку камеры.
После отключения центрифуги необходимо дать возможность ротору остановиться, запрещается тормозить ротор рукой.
–– поворотным движением надеть наконечник на шток пипетки,
— держа пипетку в вертикальном положении нажать кнопку до первого упора (фаза А),
— погрузить наконечник в жидкость на глубину 3 до5 мм(фаза В),
— набрать жидкость в наконечник медленно отпуская кнопку. Немного подождать и вынуть наконечник из жидкости (фаза С),
— прикоснуть наконечником к внутренней стенке намеченного сосуда и опорожнить наконечник, плавно нажимая кнопку до первого упора с такой же скоростью как при взятии пробы (фаза D),
— подождать около 1 секунды,
— нажимая кнопку пипетки до второго упора, удалить остатки жидкости и вынуть пипетку, скользя наконечником по внутренней стенке сосуда (фаза Е),
–– после снятия наконечника, пипетка готова к повторению цикла работы.
Запрещается набирать жидкость без предварительно наложенного наконечника.
Нельзя погружать наконечник в жидкость глубже5 мм.
Нельзя допустить, чтобы большой палец соскользнул с кнопки во время наполнения наконечника.
Нельзя поворачивать пипетки, когда наконечник наполнен жидкостью или мокрый.
Перемещение кнопки пипетки при наполнении и опорожнении наконечника должно осуществляться плавно и. медленно.
Во время дозировки жидкостей, смачивающих стенки наконечника (например: сыворотки, белка, органических растворителей), рекомендуется предварительно прополоскать несколько раз наконечник измеряемой жидкостью: в наконечник, наложенный на пипетку, нужно набрать и вылить из него жидкость, повторяя несколько раз эту операцию.
При работе с жидкостью, имеющей температуру, отличающуюся от температуры окружающей среды более 5 °С также рекомендуется многократно прополоскать наконечники.
После окончания работы следует поместить пипетку в штативе.
Клинические виды исследований, проводимые в клинико-диагностической лаборатории
Клинические и биохимические анализы несут огромную информацию для врача о состоянии здоровья больного, и их значе¬ние для лечебной практики трудно переоценить. Лабораторные исследования проводятся с целью обнаружения отклонений от нормальных показателей в биологическом материале (диагностика патологического процесса), сравнения обнаруженных отклонений с клинической картиной, анализа и постановки диагноза, определения эффективности лечения.
В клинико-диагностической лаборатории проводятся следующие виды исследований:
Клинические исследования
Анализ крови
Кроме того, для более полной картины заболевания дополнительно назначается исследование таких показателей, как свертываемость крови, длительность кровотечения, протромбиновый индекс (ПТИ), международное нормализованное отношение (МНО),уровень тромбоцитов, ретикулоциты, исследование лейкоконцентрата на наличие патологических форм лейкоцитов и др.
Показания к назначению: скрининговые и диспансерные обследования, мониторинг проводимой терапии, дифференциальная диагностика заболеваний крови.
Подготовка пациента: если предстоит сдавать общий анализ крови, последний прием пищи должен быть не позднее, чем за 1 час до сдачи крови. Завтрак может состоять из несладкого чая, несладкой каши без масла и молока, яблока. Желательно за 1-2 дня до обследования исключить из рациона жирное, жареное и алкоголь. Биохимические анализы делают строго натощак. При этом перерыв между последним приемом пищи и забором крови должен быть не менее 8-12 ч. Можно пить воду. На результат исследования может влиять прием медикаментов, воздействие рентгеновского излучения или физиотерапевтических процедур, физическое напряжение (бег, подъем по лестнице), эмоциональное возбуждение. Перед процедурой рекомендуется отдых в течение 10-15 минут.
Анализ мочи
Анализ мочи выполняется для диагностики нарушений выделительной системы организма и других заболеваний и патологических состояний.
Общий анализ мочи – позволяет обнаружить нарушения в работе выделительной системы, диагностировать заболевания почек и мочевыводящих путей. В ходе исследования определяют цвет, количество, плотность мочи, содержание в ней белка, ацетона, глюкозы, лейкоцитов, эритроцитов, эпителия, солей и др.
Анализ мочи по Нечипоренко – один из методов обследования, позволяющий выявить такие заболевания почек и мочевыводящих путей, как цистит, пиелонефрит, гломерулонефрит и пр. В ходе исследования определяют содержание в моче эритроцитов, лейкоцитов, цилиндров, белка. Исследование мочи по Нечипоренко проводят после обнаружения отклонений в общем анализе мочи.
Анализ мочи по Рейзману – так же позволяет контролировать концентрационную функцию почек. В ходе исследования определяют колебание плотности мочи и ее количество в течение суток.
Скрининг-диагностика мочи (Уринолизис) – позволяет выявить наследственную патологию с помощью проб Бенедикта, Легаля, Обермейера, Селиванова, Сулковича, тестов на гомогентизиновую и ксантуреновую кислоты;
Показания к назначению: заболевания мочевыделительной системы, скрининговое обследование при профосмотрах, оценка течения заболевания, контроль развития осложнений и эффективности проводимого лечения, диагностика наследственных заболеваний лицам, перенесшим инфекционные патологии (ангина, скарлатина и др.), которые могут осложниться другими заболеваниями. Рекомендуется сдать анализ мочи через 1-2 недели после выздоровления.
Подготовка пациента: перед сбором мочи, с целью предотвращения попадания в неё бактерий сальных и потовых желез, обязательны гигиенические процедуры. Женщинам не рекомендуется сдавать мочу во время менструации. Для выполнения общего анализа мочи и уринолизиса необходимо собирать всю порцию утренней мочи, при свободном мочеиспускании, в чистую прозрачную стеклянную емкость.
На анализ мочи по Нечипоренко сдаётся утренняя, средняя, порция мочи.
При исследовании мочи по Зимницкому в течение суток собирают 8 порций мочи: перед сбором мочи в 6.00 утра опорожняют мочевой пузырь (эта порция выливается). Начиная с 9.00 утра, через каждые 3 часа в отдельные ёмкости собирают 8 порций мочи – до 6.00 утра следующего дня. На каждой банке отмечают время сбора анализа. Проба проводится при обычном питьевом режиме и питании. Следует избегать питьевой нагрузки.
Анализ мочи по Рейзману применятся для детей младшего возраста. За сутки собирается количество порций, соответствующее количеству мочеиспусканий. Перед сбором мочи в 6.00 утра опорожняют мочевой пузырь (эта порция выливается). Начиная с 9.00 утра, через каждые 3 часа в отдельные ёмкости собирают 8 порций мочи – до 6.00 утра следующего дня. На каждой банке отмечают время сбора анализа.
Анализ кала
Позволяет изучить физические, химические и микроскопические свойства кала. В клинико-диагностической лаборатории проводятся исследования кала на скрытую кровь, яйца гельминтов, яйца остриц, лямблии и другие простейшие, так же проводится копрограмма.
Показания к назначению: исследование проводят для диагностики нарушений кислотообразующей и ферментативной функции желудка, ферментативной функции кишечника и поджелудочной железы, функции печени, ускоренной эвакуации из желудка и кишечника, всасывания в двенадцатиперстной и тонкой кишке, и определения наличия паразитов (гельминты, простейшие и др.).
Подготовка пациента: кал собирают в чистую, сухую, прозрачную широкогорлую посуду. Объем количества биоматериала в контейнере должен соотвтетсвовать 1 чайной ложке. Материал доставляют в клинико-диагностическую лабораторию сразу, или не позднее 10-12 часов после дефекации, при хранении в температурных условиях 4-8 0С.
Исследование кала на наличие так называемой скрытой крови, являющейся признаком кровотечения из органов желудочно-кишечного тракта, в целях получения достоверных результатов, требует подготовки пациента в течение 2-3 дней. В этот период отменяют медикаменты и продукты(мясо, яйца, рыбу, икру, печень, помидоры, яблоки, все зеленые овощи, гречневую крупу, гранаты, а также препараты железа), так как они могут исказить результат.
Для исследования кала на простейшие, необходимо небольшое количество кала сразу же после дефекации опустить в специальный консервант, который можно получить в лаборатории.
При исследовании кала на гельминты, за 3 дня до исследования, необходимо исключить прием противопаразитарных лекарственных средств, использование масляных клизм, ректальных свечей, рентгенологическое исследование с применением бария.
Для копрологического исследования не требуется специальной подготовки пациента, однако необходимо проконсультироваться с врачом, так как перед исследованием необходимо отменить медикаменты, влияющие на внешний вид испражнений, результаты микроскопического исследования или усиливающие перистальтику кишечника (все слабительные средства, включая касторовое и вазелиновое масло, препараты висмута, железа, бария, ваготропные и симпатикотропные средства и препараты, вводимые в ректальных свечах, приготовленных на жировой основе).
Забор материала для проведения клинических исследований крови и приём материала для проведения клинических исследований мочи и кала проводится непосредственно в клинико-диагностической лаборатории в рабочие дни с 8:00 до 10:00.
Направление врача поликлиники является обязательным при обследовании амбулаторного больного.
Биохимические исследования
Исследование белкового обмена включает в себя определение общего белка, альбумина, и белковых фракций. Снижение уровня белков наблюдается при болезнях печени, ожогах, злокачественных новообразованиях, на поздних сроках беременности, плохом питании, истощении. Повышение уровня белка встречается довольно редко, и наблюдается при сгущении крови из-за значительных потерь.
Исследование азотистого обмена включает в себя определение мочевины, креатинина, мочевой кислоты. Характеризует состояние почек (нарушение выделительной и фильтрационной способности) и печени.
Исследование липидного обмена включает в себя определение количества общего холестерина, триглицерида, липопротеиды высокой плотности(ЛПВП),липопротеиды низкой плотности (ЛПНП), липопротеиды очень низкой плотности (ЛПОНП). Результаты характеризуют состояние обмена липидов в организме. Исследования назначают при заболеваниях сердечно-сосудистой системы, сахарном диабете, гипотиреозе и др. Увеличение количества холестерина в крови свидетельствует об атеросклерозе, а уменьшение наблюдается при анемиях, туберкулезе, лихорадочных состояниях, паренхиматозной желтухе и др.
Исследование пигментного обмена включает в себя определение билирубина и его фракций. Обследуются больные с гепатитом, циррозом, механической и гемолитической желтухой.
Исследование минерального обмена включает в себя определение микроэлементов калия, натрия, хлора, магния, кальция, железа. Назначают исследование в детском возрасте для определения количества кальция в детском организме. Содержания количества магния важно при диагностике острого и хронического панкреатита, сердечной недостаточности, почечной недостаточности. Содержание железа, ферретина, трансферрина является диагностическим критерием железодефицитной анемии. В случаях назначения больному инфузионной терапии исследуют содержание калия, натрия, и хлора, с целью определения количественного и качественного состава инфузионной терапии.
Исследование системы гемостаза. С целью исследования свертывания крови назначают коагулограмму, которая позволяет определить содержание и активность различных факторов свертывания.
Снижение гаптоглобина в организме является чувствительным маркёром внутрисосудистого гемолиза. Длительно сохраняющиеся высокие значения гаптоглобина являются признаком неблагоприятного течения болезни. Уменьшение концентрации гаптоглобина чаще всего отмечается ппри гемолитической анемии, пострансфузионном гемолизе и малярии.
Повышение уровня серомукоидов наблюдается при инсульте, стрессе, ревматизме, ревмокардите, воспалительных и инфекционных заболеваниях, передающихся половым путём, опухолях, а его уменьшение свидетельствует о заболеваниях печени, эндокринной патологии, рассеянном склерозе и бесплодии.
Церулоплазмин является показателем содержания меди в организме. Исследование назначается при диагностике неуточненных гепатитов, заболеваний печени, хронической или повторной нервно-мышечной дискоординации.
Повышенные титра антистрептолизина-O указывает на стрептококковую инфекцию (ревматизм, гломерулонефрит, хронический тонзиллит, ангина, скарлатина, рожистое воспаление и др.).
Повышение уровня ревмофактора наблюдается при системной красной волчанке и других коллагенозах, гепатите, инфекционном мононуклеозе, а также при любом остром воспалительном процессе.
С-реактивный белок в крови здоровых людей отсутствует. Определяется только в организме больных, при воспалительном процессе.
Подготовка больного: благоприятным временем для сдачи венозной крови считаются утренние часы с 8:00 до 10:00. С целью получения достоверных результатов, накануне обследования, после 20-22 часов рекомендуется исключить прием пищи и жидкости. На результат исследования влияют прием медикаментов, воздействие рентгеновского излучения, физиотерапевтических процедур, физическое напряжение.
Забор крови производится в процедурных кабинетах лечебных учреждений, врачи которых назначили Вам обследование.
Иммунологические исследования
В клинико-диагностической лаборатории проводятся иммунологические исследования на определение групп крови, резус-фактора, реакции Кумбса и иммунохроматографические тесты на ротовирусы и грипп.
Определение групповой принадлежности крови и резус-фактора является обязательным исследованием при переливании крови и ее компонентов, в гинекологии и акушерстве при планировании и ведении беременности.
Иммунохроматографический тест на ротовирусы позволяет определить наличие вирусов в организме больного, в целях диагностики заболевания.
Иммунохроматографический тест на грипп применяется для качественного определения антигенов вируса гриппа.
Подготовка больного: не требуется.
Забор материала для проведения иммунологических исследований проводится в процедурных кабинетах учреждений, врачи которых назначили Вам обследование
Бактериологические виды исследований, проводимые в бактериологическом отделе клинико-диагностической лаборатории
Микробиологические (бактериологические) исследования занимают важное место в общем, комплексе клинико-лабораторных исследований, применяемых для профилактики и лечения гнойно-воспалительных заболеваний и осложнений у больных в лечебно-профилактических учреждениях. Современная клиническая медицина предъявляет бактериологическим исследованиям возрастающие требования по увеличению объема, повышению качества исследований, разработке и внедрению новых более совершенных методов. Это связано как с новыми научными достижениями в области эпидемиологии и бактериологии, так и с увеличением гнойно-воспалительных заболеваний и ростом госпитальных инфекций.
В бактериологическом отделе клинико-диагностической лаборатории проводятся следующие виды исследований:
1.Микробиологические (бактериологические) исследования
Микробиологические методы исследования крови
Показания к назначению: нарушение общего состояния больного без явного инфекционного очага, либо лихорадка неясного генеза, с целью диагностики сепсиса, принятия решения о назначении антимикробной терапии.
Подготовка больного: не требуется.
Микробиологические методы исследования спинномозговой жидкости
Показания к назначению: все случаи менингита, осложнения после черепно-мозговой травмы, нейрохирургическая операция, наличие инфекционного очага в организме (по протоколу).
Подготовка больного: не требуется.
Микробиологические методы исследования мочи
Направлены на выделение возбудителя заболевания и количественное определение степени бактериурии.
Показания к назначению: заболевание мочевыделительной системы, оценка течения заболевания, контроль развития осложнений и эффективности проводимого лечения, скрининговое обследование при профилактических осмотрах.
Подготовка больного: перед сбором мочи обязательно проведение гигиенических процедур, с целью предотвращения попадания в мочу сальных и потовых желез. Для исследования собирается утренняя, средняя, порция мочи до начала лечения антибиотиками.
Микробиологические методы исследования отделяемого дыхательных путей
Показания к назначению: заболевание дыхательных путей, оценка течения заболевания, контроль развития осложнений и эффективности проводимого лечения.
Материалом для исследования служат отделяемое зева и носа, мокрота, содержимое бронхов, материал, полученный при плевральной пункции. Забор материала проводят с соблюдением правил асептики, в предварительно простерилизованные баночки или пробирки.
Подготовка больного: материал из ротовой полости берут натощак или через 2 часа после еды. Перед сбором мокроты больной чистит зубы и полощет рот кипяченой водой, с целью исключения попадания в материал попутных микроэлементов.
Микробиологические методы исследования отделяемого глаз
Показания к назначению: заболевания конъюнктивы, век, слезных мешков, роговицы.
Подготовка больного: не требуется.
Микробиологические методы исследования отделяемого ушей
Показания к назначению: воспалительные заболевания наружного, среднего и внутреннего уха.
Подготовка больного: не требуется.
Микробиологические методы исследования отделяемого женских половых органов
Показания к назначению: гнойно-воспалительные и инфекционные заболевания.
Подготовка больного: не требуется.
Микробиологические методы исследования кала
Показания к назначению: острые кишечные заболевания, эпидемические показания, профилактические обследования декретированных контингентов.
Подготовка больного: не требуется.
Исследование кала на дисбактериоз
Показания к назначению: длительная дисфункция кишечника, сепсис, бактериемия, воспалительные заболевания желудочно-кишечного тракта.
Подготовка больного: не требуется.
Исследование на гонорею
Показания к назначению: диагностика заболевания
Подготовка больного: мужчинам не рекомендуется мочиться в течение 4-5 часов перед взятием материала. Женщинам перед забором материала, с целью достоверности исследования, не рекомендуется подмываться.
Исследование на флору и чувствительность к антибиотикам
Проводится двумя методами:
1. С использованием баканализатора «SENSITITR» (результат через 12-18 часов). Исследование оценивается компьютерной системой, после чего, с помощью карт для определения чувствительности к антибиотикам, выбирается препарат, необходимый для лечения больного. Параллельно с идентификацией проводится качественное и количественное определение чувствительности к антибиотикам.
2. Диффузии в агаре с применением дисков с антибиотиками (результат через 72 часа).
Показания к назначению: определение чувствительности возбудителя болезни к антибактериальному препарату.
Подготовка больного: не требуется.
2.Серологические методы исследования
Серологические исследования проводятся методом применения эритроцитарных диагностикумов
В бактериологической диагностической лаборатории ГБУЗ РК «Евпаторийская детская клиническая больница» проводятся исследования крови с аутоштаммами и на:
Показания к назначению: диагностика заболевания.
Подготовка больного: не требуется.
3.Иммунологические исследования методом иммуноферментного анализа
Проводятся исследования крови на:
Показания к назначению: диагностика заболевания.
Подготовка больного: исследование проводится после консультации лечащего врача.
Забор материала производится в процедурном кабинете учреждений, врачи которых назначили Вам обследование с 08.00 до 09.00