Что такое прогестерон у собак
Определение прогестерона
Прогестерон – это женский половой гормон. Его главная задача – поддержание беременности у собак.
В каких случаях назначают исследования уровня прогестерона?
В ветеринарной практике чаще всего исследуются уровни прогестерона для определения оптимального времени вязки. Это крайне важно при искусственном осеменении замороженной или охлажденной спермой, или когда кобель находится на большом расстоянии и нужно точно знать дату вязки, чтобы привезти суку или кобеля.
Как подготовить животное к исследованию?
В особой подготовке необходимости нет. Забор крови производят обычно утром натощак. Основное условие — животное не должно принимать препараты, влияющие на уровень прогестерона.
В какое время необходимо проводят исследование?
Исследование уровня прогестерона можно проводить каждые 2-3 дня, начиная с 3-5 дня от начала течки. Обычно, анализ готов в течение 24-х часов. Среднее время выполнения анализа – до 4 часов.
Каким методом проводится исследование?
Исследование проводят методом иммуноферментного анализа (ИФА).
Это количественный метод определения уровня прогестерона в сыворотке крови. Исследование выполняется в лабораторных условиях с использованием соответствующего прибора иммуноферментного анализатора с применением специальных реагентов.
Принцип определения прогестерона основан на использовании конкурентного метода ИФА. На внутренней поверхности лунок планшета иммобилизованы мышиные моноклональные антитела к прогестерону. Прогестерон исследуемого образца конкурирует с конъюгированным прогестероном за связывание с антителами на поверхности лунки. В результате образуется связанный с пластиком «сэндвич», содержащий пероксидазу. Во время инкубации с раствором субстрата тетраметилбензидина происходит окрашивание растворов в лунках. Интенсивность окраски, которую определяют на анализаторе, обратно пропорциональна концентрации прогестерона в исследуемом образце.
Как интерпретировать результаты анализа?
Количественное значение прогестерона в крови определяют в до- и постовуляторный периоды. Уровень прогестерона в сыворотке крови, как у разных собак, так и у одной и той же особи (от цикла к циклу) может меняться достаточно быстро.
Таблица показателей прогестерона у животных
ПРОГЕСТЕРОН (PROGESTERONE) ОПИСАНИЕ
Фармакологические (биологические) свойства и эффекты
Гестаген. Гормон желтого тела.
Ингибирует гипоталамо-гипофизарную систему, вследствие этого не происходит выделение гонадотропных гормонов – фолликулостимулирующего (ФСГ) и лютеинизирующего (ЛГ), и в результате не происходит созревание фолликулов и овуляция яйцеклеток.
Вызывает переход слизистой оболочки матки из фазы пролиферации, вызываемой ФСГ, в секреторную фазу, а после оплодотворения способствует переходу в состояние, необходимое для развития оплодотворенной яйцеклетки. Уменьшает возбудимость и сократимость мускулатуры матки и маточных труб, стимулирует развитие железистых элементов молочной железы.
По степени воздействия на организм относится к малоопасным веществам (4 класс опасности по ГОСТ 12.1.007).
Показания к применению препарата ПРОГЕСТЕРОН
Порядок применения
Возможно в/м, п/к или интравагинальное введение.
В/м, п/к вводят 1 раз/сут в следующих дозах:
Вид животных | Разовая доза (мг/кг) |
Лошади, крупный рогатый скот | 0.02-0.2 |
Свиньи, овцы, козы | 0.3-0.5 |
Собаки, кролики | 0.4-0.6 |
Интравагинально капсулы вводят коровам или телкам при помощи специального аппликатора.
Для синхронизации охоты у крупного рогатого скота вводят во влагалище на срок от 7 до 12 дней. Сразу после извлечения препарата животному вводят 25 мг динопроста. Животные приходят в охоту через 36-96 ч после извлечения капсулы, основная часть коров и телок приходит в охоту через 72 ч.
Для лечения анэструса у коров средство вводят на 7 дней, после извлечения вводят хорионический гонадотропин в дозе 400 ИЕ. Большинство животных приходят в охоту в течение 48-72 ч после извлечения капсулы.
Побочные эффекты
В редких случаях при интравагинальном введении возможно раздражение кожного покрова около влагалища и слизистые выделения из влагалища. Данные явления сразу проходят после удаления капсулы из влагалища.
Симптомы передозировки у коров не установлены.
Противопоказания к применению препарата ПРОГЕСТЕРОН
Особые указания и меры личной профилактики
При применении лекарственного средства животным с низкой упитанностью или животным, уровень кормления которых не соответствует их физиологическому состоянию, эффективность препарата может быть снижена.
Молоко и мясо животных можно применять в пищу людям без ограничений. При вынужденном убое (в случае интравагинального введения) средство извлекают из влагалища.
При работе с прогестероном рекомендуется надевать перчатки, с тем, чтобы избежать возможной резорбции препарата через кожу. Запрещается пить, курить и принимать пищу. После работы с лекарственным средством вымыть руки с мылом.
При попадании прогестерона на кожу и слизистые оболочки необходимо промыть их большим количеством водопроводной воды.
Прогестерон у собак
Наталья Ивановна Колядина
к.в.н., ветеринарный врач репродуктолог, член EVSSAR, член Ассоциации практикующих ветеринарных врачей, член Российского общества ветеринарной иммунологии, докладчик международных ветеринарных конгрессов и региональных конференций, эксперт WorldSkills Russia.
Прогестерон – это стероидный гормон, который синтезируется в яичниках у самок. Его главной функцией является поддержание беременности.
Для чего необходим прогестерон
Задача прогестерона – создать благоприятные условия в матке для поддержания беременности:
Концентрация прогестерона у сук во время овуляции и беременности
Прогестерон синтезируется у сук в яичниках, в стенках больших (еще не разорвавшихся) фолликулов, а после овуляции желтое тело (временная эндокринная железа, которая образовывается на месте овулировавшего фолликула) активно продолжает продуцировать прогестерон. (2,3,4)
Отличительной особенностью полового цикла собаки является то, что после овуляции, вне зависимости от того, была вязка или нет (наступила беременность или нет), в яичниках желтые тела продуцируют прогестерон приблизительно одинаковый промежуток времени (лютеиновая фаза полового цикла). (3,4,8) Поэтому у сук не подтверждают беременность по уровню прогестерона. Также у беременной и не беременной собаки одинаковый уровень половых гормонов (таблица 1).
Учитывая эти факты, можно развенчать распространенный миф «повязать для здоровья животных». Не существует заболеваний, которые может профилактировать беременность. Вязки у сук проводят только с целью получения приплода.
Когда необходимо проводить исследование на прогестерон
Самый большой процент нерезультативных (пустых) вязок собак происходит по причине их проведения в неправильно выбранное время. (2,4) На результат влияет концентрация прогестерона у сук на момент вязки, поэтому анализ крови на данный гормон часто применяется при планировании вязки или искусственного осеменения. (3)
Показания к определению уровня прогестерона в крови:
Когда стоит вязать собаку для получения наибольшего помета
Незначительный подъем уровня прогестерона отмечается незадолго до овуляции и служит показателем ее приближения. О наступлении овуляции свидетельствует скачкообразное повышение уровня прогестерона.
Во время овуляции происходит разрыв стенок фолликулов. При разрыве из них высвобождаются яйцеклетки и жидкость, содержащая прогестерон. В результате повышается уровень прогестерона в крови, что подтверждается анализом. Также этот процесс можно отследить при динамическом ультразвуковом исследовании яичников. Анализ на прогестерон и УЗИ яичников с отслеживанием развития фолликулов является «золотым стандартом» при подготовке суки к вязке или искусственному осеменению.
Рисунок 1. Ультразвуковая картина овуляции в сопоставлении со схематичным изображением
После овуляции яйцеклетки проходят завершающие стадии второго мейотического деления и становятся зрелыми. Этот процесс занимает в среднем двое суток. Яйцеклетки выходят не все сразу из обоих яичников, этот процесс также происходит в течение двух суток. По этой причине делается повторная (контрольная) вязка, чтобы сперматозоиды встретились с максимальным количеством созревших яйцеклеток. Таким образом повышая количество щенков в помете.
Процесс искусственного осеменения проводят в период, когда созрело максимальное число яйцеклеток. (5)
Рисунок 2. Схематичное отображение уровня половых гормонов у суки в сопоставлении с процессом овуляции и созревания яйцеклетки
Определение уровня лютеинизирующего гормона (ЛГ)
Для прогнозирования овуляции также можно сдавать анализ на уровень лютеинизирующего гормона (ЛГ). Повышение уровня ЛГ является кульминацией полового цикла суки и служит триггером овуляции.
Плюсами диагностики повышения уровня ЛГ является то, что можно прогнозировать овуляцию заранее, при необходимости даже спланировать дальнюю поездку для проведения вязки. Недостатком является то, что за короткий промежуток времени ЛГ поднимается и вновь спускается к исходному уровню. Чтобы отследить его повышение, кровь необходимо сдавать ежедневно. Овуляция происходит в среднем через 48 часов после подъема ЛГ. (6,9)
Рисунок 3. Схематичная картина овуляции в сопоставлении с повышением уровня ЛГ и прогестерона к фертильному периоду и сроку жизни яйцеклеток
Анализ крови у собаки на прогестерон
Анализ крови у собаки на прогестерон сдается натощак. Существует несколько лабораторных методов его определения:
Сроки исполнения анализа на прогестерон зависят от технических возможностей анализаторов и режима работы лабораторий. Наиболее достоверным методом определения концентрации уровня прогестерона в сыворотке крови зарекомендовал себя метод ИФА. Метод исполнения анализа, как правило, вносится в бланк лаборатории вместе с его результатом.
Как интерпретировать результаты анализа на прогестерон
Принятые единицы измерения прогестерона: нг/мл и нмоль/л. 1 нмоль/л = 0,318 нг/мл. Для оценки результата обязательно нужно обращать на них внимание.
Овуляция у сук происходит спонтанно. Поэтому при достижении уровня прогестерона выше базального (>1 нг/мл), интервал между исследованиями уменьшается, чтобы не пропустить овуляцию. Информативность исследования на прогестерон значительно повышается при его динамическом исследовании.
Следует отметить, что некоторые суки овулируют на уровне 5 нг/мл, другие – на 6 или даже 7 нг/мл. Поэтому для полной информации о процессах, происходящих в яичниках, в дополнении к анализу на прогестерон делают ультразвуковое исследование. (2)
Оптимальные сроки вязки
Оптимальные сроки вязки у собак следующие: сутки после овуляции с повтором через сутки.
Искусственное осеменение криоконсервированной спермой проводят не ранее чем через двое суток после овуляции, так как оттаянные сперматозоиды живут гораздо меньше и процедуру проводят уже на созревшие яйцеклетки. Поэтому не следует волноваться, если получен анализ овуляторного уровня прогестерона – есть время даже на транспортировку суки на значительное расстояние к кобелю.
Уровень прогестерона во время беременности собаки
Уровень прогестерона во время беременности у сук держится на высоком уровне в первой половине, а во второй постепенно начинает снижаться, доходя до базального уровня непосредственно перед родами. (1,2,4,8)
Рисунок 4. Схематичное отображение уровня гормонов при беременности у суки в норме
Низкий уровень прогестерона после овуляции – это патологическое состояние (недостаточность желтого тела или недостаточность лютеиновой фазы), при котором в яичниках продуцируется недостаточное количество прогестерона для поддержания беременности. Это может привести к различным последствиям.
Если прогестерон снижается в короткий срок после овуляции, то беременность у собак не наступает, оплодотворенные яйцеклетки просто не прикрепляются к стенке матки. Если прогестерон снижается во время уже наступившей беременности, то, в зависимости от срока после овуляции, это приводит к различным последствиям – резорбции эмбрионов или плодов либо к аборту. (4,7)
Следует отметить, что у каждой суки свой уровень прогестерона во время беременности.
Рисунок 5. Схематичное отображение снижения уровня прогестерона в норме и при недостаточности желтого тела
Недостаточность лютеиновой фазы (гипофункция желтого тела)
Недостаточность лютеиновой фазы – это ситуация, когда в яичниках жёлтые тела вырабатывают недостаточное количество прогестерона для поддержания нормального течения беременности. Данная патология встречается довольно часто и на ранних сроках может протекать бессимптомно. Нужно иметь в виду несколько фактов:
Часто заводчики задают вопрос: если уровень прогестерона после вязки высокий, значит моя собака беременна? Нет, это говорит о том, что желтые тела в яичниках продуцируют прогестерон на достаточном уровне, создавая благоприятные условия для протекания беременности. Для подтверждения беременности у собак принято использовать метод УЗИ.
Безусловно уровень прогестерона имеет важное значение во время планирования вязки, ведения беременности. Однако оценивать полученный результат анализа как для определения сроков вязки собак, так и во время беременности рекомендуется в ветеринарных клиниках с учетом его динамических значений.
Прогестерон у сук
В наше время, когда заводчики профессионально занимаются разведением собак, улучшая их породные качества очень важно быть уверенным в том, что проводимое спаривание животных будет иметь положительный результат.
Рассмотрим способ при котором проводится контроль уровня гормона прогестерона и на основании полученных результатов планируются мероприятия по разведению.
Существует несколько видов гормонов, которые регулируют течку и беременность у собак.
— Эстроген: стимулирует производство яйцеклеток.
— Лютеинизирующий гормон (ЛГ): стимулирует выход яйцеклеток из яичников.
— Прогестерон: поддержание беременности.
Изменение уровня гормонов может помочь в определении времени вязки и ожидании родов.
В каких случаях это необходимо?
— Если кобель находится в удаленном месте.
— Когда проводится искусственное осеменение
— Когда предыдущая вязка не привела к беременности
У собак овуляция происходит когда уровень эстрогенов в крови снижается, а уровень прогестерона возрастает.
Уровень эстрогена дает возможность определить, когда у собаки начнется течка, но не дает возможности определить момент вязки.
Уровень прогестерона и лютеинизирующего гормона дает достоверную информацию о времени овуляции.
Эти гормоны также помогут определить момент родов и запланировать заводчику родовспоможение или кесарево сечение.
Определение уровня Лютеинизирующего гормона (ЛГ)
ЛГ химически отличается у разных видов животных, поэтому проводится только в ветеринарных лабораториях, где есть в наличии тесты конкретно для собак.
Результаты как правило готовы в течение суток.
Тест на определение уровня лютеинизирующего гормона необходимо делать ежедневно, начиная с конца проэструса.
Всплеск уровня гормона длится только 24 часа, поэтому его повторяют ежедневно для того, чтобы поймать его.
Всплеск как правило происходит за 48 часов до овуляции.
Определение уровня прогестерона
Результаты должны быть получены в течение 24 часов после сдачи крови.
Исследование уровня прогестерона можно проводить каждые 2-3 дня, начиная с 3-5 дня от начала течки:
— начальный уровень прогестерона менее 3,18 нмоль /л (1,0 нг/мл) до дня всплеска лютеинизирующего гормона;
— в день всплеска Лютеинизирующего гормона (ЛГ), концентрация уровня прогестерона поднимается до 6,36-9,54 нмоль/л (2-3 нг/мл);
— на следующий день после пика Лютеинизирующего гормона (ЛГ) концентрация прогестерона составляет 9,54-12,72 нмоль/л (3-4 нг/мл);
— овуляция происходит на уровне прогестерона 15,9 нмоль/л (5 нг/мл).
Сроки вязки
При достижении уровня прогестерона 7,95 нмоль/л (2,5 нг/мл) необходимо начать готовиться к вязке. Уведомить владельца кобеля или ветеринарного врача, который будет проводить искусственное осеменение.
Оптимальными сроки вязки:
— При достижении уровня прогестерона 15,9 нмоль/л (5 нг/мл), вязка осуществляется через 24-48 часов;
— Искусственное осеменение с помощью охлажденной спермы проводится через 4 дня после достижения уровня прогестерона 7,95 нмоль/л (2,5 нг/мл) или 48 часов после отметки 15,9 нмоль/л (5 нг/мл);
— Искусственное осеменение с помощью замороженной спермы выполняется через 5 дней после отметки 7,95 нмоль/л (2,5 нг/мл) или 72 часа после отметки 15,9 нмоль/л (5 нг/мл).
Уровень прогестерона во время беременности
После овуляции уровень прогестерона продолжает расти в течение 2-3 недель, в конечном итоге он достигает уровня 31,8-254,4 нмоль/л (10-80 нг/мл).
Этот уровень необходим для поддержания беременности и сохраняется у собак в течение 60 дней.
За 48 часов до родов показатель прогестерона начинает падать до уровня 6,36 нмоль/л (2 нг/мл), а за 24 часа до родов падает до 3,18 нмоль/л (1 нг/мл).
Это важно определить для проведения времени кесарева сечения, т.к. во время проведенная операция увеличивает выживаемость потомства.
Результаты анализов должны быть готовы в течение 24 часов.
Стоимость исследований можно уточнить в разделе Гормоны
Определение сроков вязки
У собак сроки вязки напрямую зависят от даты овуляции.
Овуляция — это выход яйцеклеток из овариальных фолликулов в маточные трубы. У собак фолликулы овулируют одномоментно в течение короткого времени. Яйцеклетки после овуляции в маточных трубах дозревают еще 2-3 дня, в этот период они не могут быть оплодотворены. То есть период овуляции и фертильный период (момент, когда возможно зачатие) у собак не совпадает. Фертильный период начинается через 2-3 дня после овуляции. Зрелые, готовые к оплодотворению яйцеклетки живут около 2-3 дней. Далее неоплодотворенные яйцеклетки погибают.
Поэтому определяется день овуляции, а далее вязка проводится на 1–3 день после овуляции — это и есть оптимальные сроки вязки у собак.
В современной репродукции мелких домашних животных чаще всего используются три основных метода определения оптимального времени вязки у сук: цитологическое исследование влагалищных мазков, определение уровня прогестерона и УЗИ яичников.
Вагинальная цитология
Цитология влагалищных мазков — метод, который позволяет оценить изменение морфологии (внешнего вида) эпителиальных клеток влагалища под действием полового гормона эстрадиола.
В начале течки яичники начинают выделять все больше и больше эстрадиола — гормона, который обуславливает все видимые проявления течки. Это и увеличение вульвы, и отек всего репродуктивного тракта, и кровянистые выделения, и изменения поведения, и многое другое. Он же заставляет клетки эпителия влагалища — поверхностный слой, покрывающий слизистую, активно размножаться. В результате клетки изменяют свой внешний вид от маленьких с четким ядром до крупных безъядерных.
Чем больше крупных безъядерных клеток, тем ближе оптимальный период для вязки — фертильный период. При преобладании в мазке поверхностных безъядерных — ороговевших клеток (более 60-70%) наступает стадия цикла — эструс, время около овуляции.
Но проблема метода заключается в том, что он оценивает лишь ответ тканей на воздействие эстрадиола. У разных собак ответ эпителия слизистой может отличаться. Как правило, наступление охоты у большинства сук (около 60-65%) совпадает с наступлением картины эструса в мазке и обычно наблюдается за 2 дня до овуляции. Но, к сожалению, такая удобная закономерность видна не у всех. У некоторых сук картина эструса в мазке видна позже овуляции, и при стандартных расчетах можно просто опоздать. У некоторых картина эструса наблюдается задолго до овуляции, и вязка может случиться слишком рано. Помимо этого, однократное исследование не позволяет делать прогнозов.
Точность определения оптимального периода для вязки с помощью мазков из влагалища составляет около 65%. Остальные 30-40% собак требуют более точных методов определения оптимального времени вязки.
Мы не используем вагинальную цитологию для определения сроков вязки у собак. Но эта методика крайне полезна, когда необходимо диагностировать воспалительные проблемы репродуктивного тракта у сук. Если нужно понять, в какой стадии цикла находится собака, например, при скрытых, бескровных течках. Когда стоит вопрос — а не опоздали ли мы с вязкой (например, течку заметили уже слишком поздно)? Метод вагинальной цитологии позволяет точно определить конец фертильного периода.
Гормональные тесты
Для точного определения времени овуляции подходит измерение уровня прогестерона крови. Этот метод позволяет поймать период овуляции с точностью до 85%. У собак, в отличие от других млекопитающих, прогестерон начинает подниматься еще до овуляции. Связано это с тем, что зрелый предовуляторный фолликул в своей стенке уже имеет клетки, синтезирующие этот гормон.
Уровень прогестерона у собак во время течки поднимается по-разному, как до, так и после овуляции. До овуляции он может подниматься у одних очень медленно и плавно, у других долгое время оставаться низким и потом активно начать расти. Но в день овуляции он равен в среднем 6-8 (5-10) нг/мл у всех собак в независимости от размера и породы. Некоторый разброс в овуляторных цифрах зависит больше от особенностей лабораторий, в которых проводится анализ, а не от особенностей организма собак.
Есть две часто используемых единицы измерения прогестерона — нг/мл и нмоль/л. Неважно, в каких единицах дает ответ лаборатория. Если вы привыкли к каким-то конкретным единицам, всегда можно перевести одну цифру в другую. Воспользуйтесь простой формулой:
А что если прогестерон в течение течки поднялся и упал? Не стоит переживать, если при уровне прогестерона до 1-2 нг последний результат будет ниже предыдущего. Такие колебания возможны в норме. Но вот если прогестерон достиг цифры более 3-5 нг и в очередной пробе крови снизился, то стоит проконсультироваться с врачом.
А есть ли «хороший» прогестерон для вязки? У собак период овуляции и фертильный период не совпадают. Незрелый ооцит еще 48-72 часа дозревает в яйцеводах. Прогестерон у всех собак после овуляции поднимается по-разному. Есть «быстрые» собаки, есть «медленные». За эти 2-3 дня к моменту наступления фертильного периода у одной собаки прогестерон может быть 20 нг/мл, а у другой 100 нг/мл. Именно поэтому, когда анализ сдан однократно, и мы получили уже высокие постовуляторные цифры прогестерона, совершенно невозможно сказать «хороший» это уровень или нет. Но тут на помощь придет вагинальная цитология. И наоборот, если два дня назад уровень прогестерона был овуляторным (например, 7,4 нг/мл), а сегодня он равен 67 нг/мл, мы будем точно уверены, что не опоздали с вязкой, так как от овуляции прошло всего 2 дня.
Точность метода очень высока, но, к сожалению, если анализ сдан однократно и уровень его еще не соответствует овуляторному, совершенно невозможно предсказать, когда овуляция наступит. Есть определенные рамки, которые позволяют рассчитать примерные сроки пересдачи анализа, но все собаки индивидуальны. Чтобы быть уверенными, что овуляция сегодня — мы должны увидеть овуляторный прогестерон на сегодняшний день!
Данная таблица подскажет, когда нужно пересдать прогестерон или наступила овуляция: