Стероидный профиль в слюне (17-ОН-прогестерон, андростендион, ДГЭА, кортизон, кортизол, прогестерон, тестостерон, эстрадиол)(ВЭЖХ)
Описание
Стероидный профиль — это лабораторное исследование, которое помогает оценить процесс синтеза стероидов в организме. Анализ выявляет уровень стероидных гормонов и их промежуточных метаболитов.
Для исследования необходимо самостоятельно собрать порцию cлюны в контейнер Salivette (с тампоном). Контейнер можно заранее взять в медицинском офисе. Указать на пробирке время взятия пробы.
За сутки до взятия пробы следует исключить употребление спиртных напитков, кофеина, алкоголя. В течение одного часа до сбора слюны не курить. За 30 минут до сбора — воздержаться от приема пищи, жевательной резинки, нельзя пользоваться зубной нитью и чистить зубы. За десять минут до сбора слюны ополоснуть рот водой.
Нецелесообразно проводить исследование на фоне приема седативных средств, кортизона ацетата, эстрогенов, пероральных контрацептивов и глюкокортикоидных препаратов, в том числе мазей, поскольку велика вероятность повышения уровня кортизола. Отмена лекарственных средств производится строго по рекомендации лечащего врача.
Сбор слюны в контейнер Salivette
Недопустимо собирать слюну в несколько приемов.
До отправки биоматериал хранить в холодильнике при 2–8°С. Материал должен быть доставлен в медицинский офис в день сбора. При невозможности немедленной доставки в медицинский офис, материал может быть сохранен при 2–8°С в течение 6 часов.
Интерпретация результатов
Референсные значения:
Исследование стероидного профиля крови методом тандемной масс-спектрометрии
Стероидные гормоны образуются из холестерина в процессе многочисленных превращений, каждый этап осуществляется под действием определенного фермента. Синтез осуществляется преимущественно в коре надпочечников. В процессе синтеза происходит дифференцировка стероидов на 3 вида: минералокортикоиды, глюкокортикоиды и половые гормоны.
Исследование стероидного профиля крови позволяет провести одновременную оценку уровня метаболитов (промежуточных продуктов) всех стероидных гормонов.
Для чего предназначено исследование стероидного профиля?
В рамках комплексного обследования заболеваний гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы и адреногенитального синдрома с целью выявления или исключения нарушений на уровне надпочечников.
Кому показано исследование?
Обычно обследуются пациенты со следующими проблемами:
Что именно определяется в процессе анализа?
Уровень промежуточных метаболитов стероидных гормонов в процессе многоступенчатых превращений. Анализ выполняется методом тандемной масспектрометрии.
Состав профиля:
Что означают результаты исследования стероидного профиля?
Интерпретацией результатов занимается лечащий врач. Анализ уровня метаболитов позволяет врачу определить, на каком промежуточном этапе синтеза стероидных гормонов произошло нарушение и/или какой фермент перестал функционировать.
Как правильно подготовиться к исследованию?
Сдаётся венозная кровь утром натощак, после 8-12 часов голода, воду пить в обычном режиме. За 48 часов рекомендуется отменить лекарственные препараты, содержащие эстрогены и андрогены, за сутки исключить тяжелые физические нагрузки и стрессы.
Определение гормонов в слюне
Гормоны являются мощными молекулами, необходимыми для поддержания физического и психического здоровья. Семейство стероидных гормонов включает эстрогены — эстрон (E1), эстрадиол (E2), эстриол (E3), прогестерон, тестостерон, ДГЭА-С и кортизол. Вариация этих гормонов играет большую роль в изменениях, наблюдаемых в основных событиях жизненного цикла, таких как беременность, менопауза и старение. Поэтому точное измерение уровней гормонов помогает достоверно оценить нарушения менструального цикла у молодых женщин, климактерические изменения у женщин в пре- и постменопаузе, и изменения в период андропаузы у мужчин. Несбалансированность любого гормона может вывести физическое и психическое здоровье из равновесия, вызвав усугубление и даже серьезные проблемы со здоровьем.
| Существует несколько способов проверки гормонов (слюна, сыворотка и моча), но самый современный метод — слюна. Это связано с тем, что в слюне измеряются только активные части гормонов. Анализ измеряет количество гормона, доступного для тканей-мишеней, то есть биодоступное количество. По этой причине тестирование слюны лучше соотносится к конкретным симптомам избытка или дефицита гормонов и является хорошим способом мониторинга гормональной терапии. |  |
Признание достоверности тестирования слюны основано на понимании разницы между стероидными гормонами в слюне и сыворотке. Большинство гормонов существует в одной из двух форм: свободный (5%) или связанный с белком (95%). Только свободные гормоны являются биологически активными или биодоступными и доступны для связывания с рецепторами. Гормоны, связанные с белками, не соответствуют рецепторам и считаются небиоактивными. Когда кровь фильтруется через слюнные железы, компоненты связанных гормонов слишком велики, чтобы проходить через клеточные мембраны. Только несвязанные гормоны попадают в слюну. Тест слюны измеряет биодоступный гормон — клинически значимую часть, передаваемую рецепторам в тканях-мишенях организма.
Уровни гормонов слюны намного ниже, чем значения сывороточных показателей. При назначении гормональной терапии, основанной на результатах измерения гормонов в сыворотке, существует риск назначения сверхдоз препаратов. Если определить значения гормонов у этих же пациентов в слюне, то результаты будут необычайно высокими.
Исследования показывают, что при использовании местной или трансдермальной гормональной терапии, уровень тканевого гормона увеличивается (измеряемый в слюне), в то время как значения сывороточных показателей остаются без изменений. Поэтому сывороточное тестирование не может использоваться для мониторинга гормональной терапии такого рода. Только тестирование слюны является наиболее точным инструментом.
Показания к исследованию гормонов в слюне
С возрастом в организме мужчин и женщин изменяется гормональный фон. Иногда эти изменения приводят к симптомам, которые требуют внимания.
Мультистероидный анализ крови: определение жизненно необходимых гормонов человека на качественно новом уровне
Термином «мультистероидный анализ» называют определение профиля стероидных гормонов методом хромато-масс-спектрометрии. Совокупность результатов этого анализа обозначают термином «стероидный профиль». В сущности, это два равнозначных термина, обозначающих одно и то же.
В настоящее время мультистероидный анализ не входит в список тестов, утвержденных Министерством здравоохранения РФ, и осуществляется в рамках проведения научного исследования. Пациенты сами вынуждены оплачивать стоимость проведения данного анализа. Ведётся работа над тем, чтобы в будущем эти расходы покрывались за счет страховой медицины.
Рис 1. Аналиты, определяемые в ходе одного анализа, согласно методике
Почему в названии методики присутствует обозначение биоматериала «кровь»?
Для того, чтобы сразу обозначить отличие его от широко известного анализа «стероидный профиль мочи». Следует отметить, что информативность анализа мочи совсем другая и требует иной трактовки, поскольку в моче содержатся в основном неактивные формы стероидов: сульфаты, глюкурониды и гидроксилированные производные, уже ненужные организму, и выведенные из него. В крови же определяют концентрации активных форм стероидных гормонов, которые циркулируют в системе общего кровоснабжения, поступают в клетки и оказывают сигнальное воздействие на геном.
При каких медицинских состояниях показано определение стероидного профиля крови, каким врачам стероидный профиль крови поможет с постановкой диагноза?
1. Всевозможные формы врожденной дисфункции коры надпочечников (ВДКН). ВДКН является врожденным заболеванием, проявляющемся в нарушении биосинтеза стероидов. Вызывается нарушением функционирования одного из 5 ферментов коры надпочечников. Это может быть дефицит 21a-гидроксилазы (CYP21) или 11b-гидроксилазы (CYP11B1). Традиционный скрининг новорожденных на ВДКН методами иммуноанализа зачастую дает ложноположительные результаты при определении 17-гидроксипрогестерона. Поэтому во всех спорных случаях необходима подтверждающая диагностика методом LC-MS/MS [1]. Диагностика неклассической формы ВДКН (НФ ВДКН) иммунохимическими методами представляет значительную трудность, поэтому НФ ВДКН зачастую не диагностируется при неонатальном скрининге, но даёт о себе знать в последствии: у подростков появляется преждевременное оволосение, угревая сыпь; у девочек – гирсутизм, менструальная дисфункция, репродуктивные нарушения. Для стероидного профиля при НФ ВДКН характерно повышение 21-дезоксикортизола и 17-ОН-прогестерона, поэтому мультистероидный анализ в комплексе с генетическим тестированием чрезвычайно полезны для диагностики этого заболевания.
2. Надпочечниковая недостаточность. Для этого проводится стимуляционный тест с АКТГ и измеряются уровни кортизола, альдостерона, и 11-дезоксикортизола: базальные, через 30 и 60 минут после стимуляции. При первичной надпочечниковой недостаточности альдостерон не реагирует на стимуляцию, в то время как при вторичной недостаточности регистрируется повышение его уровня. В контрольной группе уровень 11-дезоксикортизола повышается в 15-20 раз в ответ на стимуляцию АКТГ, а кортизола – примерно в 3 раза [2].
3. Гипогонадизм у мужчин. Для правильной диагностики гипогонадизма у мужчин требуется определение точного уровня общего тестостерона (ТТ) с использованием масс-спектрометрии. В исследовании на 10000 добровольцах было установлено, что диагноз гипогонадизма можно поставить, если концентрация ТТ ниже 12.1 нмоль/л по данным масс-спектрометрии [3].
4. Контроль заместительной терапии у мужчин и женщин (HRT). Для данной категории пациентов масс-спектрометрия является «золотым стандартом», так как позволяет подобрать правильную терапевтическую дозу гормона (или стимулятора), детально проследить за реакцией всех метаболитов на заместительную терапию и избежать интерференции, присущей иммунохимическим методам 5.
5. Очень важно отслеживать уровни стероидных гормонов в ходе беременности и в течение одного года после родов. Мультистероидный анализ даёт гораздо более точную информацию об андрогенном статусе по сравнению с традиционным ДГЭА-сульфатом.
6. Гинекология. «Вирилизирующие» (андрогенпродуцирующие) опухоли надпочечников обладают андрогенпродуцирующей активностью и обусловливают развитие вирильного синдрома у женщин. Установлено, что практически любая гормонально активная опухоль яичников может быть источником избыточной продукции андрогенов и/или эстрогенов и должна быть диагностирована с использованием метода тандемной масс-спектрометрии [7].
7. Диабет. Данное заболевание затрагивает на нервную систему и оказывает влияние на концентрацию нейростероидов. LC-MS/MS дает возможность определять концентрации нейроактивных стероидов с целью разработки новых подходов в лечении диабетической нефропатии [8].
8. Спортивная медицина. Стероидный профиль у спортсменов в крови и в слюне может дать важную информацию о состоянии их здоровья, спортивной форме, контролировать ход тренировок за счет оптимального распределения нагрузок.
Мультистероидный анализ с трудом пробивает для себя место в жизни с учетом широкого распространения методов иммуноанализа и сопротивления со стороны приверженцев традиционных технологий. Но за этим методом будущее, это уже признано лучшими представителями медицинской науки [9].
Кортизол (слюна) в Сунже
Кортизол — гормон коры надпочечников, который контролирует основные процессы обмена веществ и участвует в регуляции ответа организма на стресс. В слюне человека определяется биологически-активная форма гормона. Данное исследование используется для оценки функции коры надпочечников.
Приём и исследование биоматериала
Когда нужно сдавать анализ Кортизол (слюна)?
Подробное описание исследования
Глюкокортикоид кортизол является основным стероидным гормоном коры надпочечников, уровень которого в жидкостях организма отражает активность гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой оси (ГГНО).
Продукция кортизола зависит от функциональной активности надпочечников и состояния гипофиза. Адренокортикотропный гормон (АКТГ), вырабатываемый гипофизом, регулирует синтез и высвобождение кортизола по принципу обратной связи, т.е. когда концентрация кортизола в крови снижается, усиливается выработка АКТГ. АКТГ в свою очередь стимулирует надпочечники из-за чего увеличивается выработка кортизола, что уменьшает продукцию АКТГ.
Секреция кортизола демонстрирует отчетливый циркадный (суточный) ритм с максимумом между 6-ю и 9-ю часами и резким снижением к полуночи.
В плазме крови кортизол представлен свободной формой — около 5-10 % всего вырабатываемого кортизола — и соединениями с белками плазмы, преимущественно транскортином и альбуминами, а также в виде метаболитов. Свободный кортизол выделяется с мочой, а также определяется в слюне человека.
Биологической активностью обладает только свободная форма гормона. Ее концентрацию можно определить в слюне.
Динамическое исследование уровня кортизола в слюне является чрезвычайно информативным и нетравматичным методом, который используется в эндокринологии, физиологии, спортивной медицине и других областях для оценки функции коры надпочечников.
Оценка кортизола в слюне широко применяется при диагностике состояний, сопровождаемых гиперпродукцией кортизола (болезнь Иценко-Кушинга) и считается золотым стандартом для исследования избыточной продукции гормонов корой надпочечников.
Сочетание клинических симптомов, которые отмечаются при хроническом повышении уровня кортизола, называют синдромом Кушинга. Характерные клинические симптомы включают:
В высоких концентрациях кортизол способствует развитию артериальной гипертензии и аритмии (нарушению частоты сердечных сокращений). Также избыток гормона вызывает снижение всасывание кальция в кишечнике, что может приводить к остеопорозу с развитием патологических переломов даже у лиц молодого возраста.
На фоне гиперпродукции кортизола ухудшается течение инфекционных заболеваний, длительно заживают раны. Также избыток гормона может приводить к нарушению фертильности (способности к рождению детей) за счет подавления секреции фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) и лютеинизирующего гормона (ЛГ). У мужчин это проявляется снижением полового влечения и импотенцией, а у женщин возможно развитие нарушений менструального цикла, вплоть до ановуляции (отсутствие овуляции) и аменореи (отсутствие менструации).
Избыток гормона может провоцировать развитие неврозов, вплоть до бредовых расстройств и тяжелой клинической депрессии.
Дефицит кортизола проявляется повышенной утомляемостью, беспричинным снижением массы тела, раздражительностью. Как правило, дефицит гормона наблюдается при большинстве синдромов недостаточности надпочечников, когда снижается продукция всех адренокортикотропных гормонов. Снижение функциональной активности надпочечников может быть первичным (дисфункция самих надпочечников, например при болезни Аддисона) или вторичным (недостаточная стимуляция надпочечников со стороны гипоталамуса и гипофиза).
Данное неинвазивное и высокоэффективное исследование используется для начальной диагностики состояний, связанных с избытком или дефицитом гормона.