Для всех
Полезная информация для каждого
Контейнеры и транспортные среды
Контейнер для биоматериалов служит для забора и дальнейшей транспортировки для лабораторных исследований и анализов кала, а также других биологических материалов. Такие контейнеры изготавливаются из чистейшего полипропилена или же медицинского прозрачного полистирола. Эти материалы являются нейтральными и химически и бактериально. Конструкция контейнера имеет достаточно высокую механическую устойчивость и много других технических и эксплуатационных преимуществ. Контейнер для сбора биоматериалов оснащается, как правило, специальной лопаточкой для удобного сбора биологических веществ (кала).
Использование такой тары в специализированном корпусе, при транспортировке в медицинские учреждения практически исключает вероятность попадания в анализы (мочи, кала) посторонних веществ, что дает гарантию проведения качественного анализа и получения достоверных результатов. Процесс производства таких контейнеров проходит в стерильной атмосфере и материал обрабатывается при температурной нагрузке +250°С. Весь процесс полностью автоматизирован без применения ручных манипуляций, что гарантирует исключение вероятности попадания внутрь контейнеров различных посторонних примесей.
Любая конструкция контейнера для биоматериала оснащена герметично завинчивающейся крышкой, как правило, красного или желтого цвета, обеспечивающей защиту от утечки, расплескивания содержимого и ингаляционного контакта. Эта крышка оснащена небольшой специальной лопаткой (ложкой) для удобного сбора биоматериала. Для нанесения на контейнер информации о пробе на практически полностью прозрачной стенке имеется матовая панель или этикетка.
При выборе контейнера для биовеществ определяются физические характеристики, наличие правильных барьерных свойств (защиты от влаги). Сегодня на соответствующем направлению рынке существует около 90 типов пластиковых контейнеров и сотня модифицированных видов. Преимущества пластиковых контейнеров для сбора биологических материалов:
Контейнеры изготавливаются из нескольких типов материалов: полипропилен (ПП), полистирол (ПС).
Контейнеры из ПС обладают идеальной прозрачностью, контейнеры из ПП слегка мутные, но обладают высокой механической прочностью.
Контейнеры выдерживают низкую температуру, благодаря чему их можно транспортировать в термоконтейнерах при пониженной температуре.
Контейнеры снабжены герметично завинчивающейся крышкой из ПЭВД. Контейнеры выпускаются двух видов: стерильные и нестерильные. Контейнеры стерильные используются чаще всего как контейнеры для сбора материала на бактериологический анализ. Стерильные контейнеры для анализов могут быть помещены в индивидуальную упаковку и реализовываться через аптечную сеть или специальные аппараты в поликлинических и стационарных учреждениях. Контейнер на 125 мл – универсальный и подходит как для отбора мочи (контейнер для мочи) на клинический или бактериологический анализ, так и для отбора проб на пищевых и фармацевтических производствах и прочих типов проб. На стенке контейнера имеется матовая панель для удобства маркировки.
1. Транспортная среда – предназначена для сохранения и поддержания жизнеспособности микроорганизмов от момента отбора пробы до начала исследования
2. Среда сохранения – предназначена для длительного хранения и поддержания жизнеспособности микроорганизмов
3. Среда восстановления – позволяет находящимся в состоянии стресса и ослабленным микроорганизмам восстанавливать способность для нормального роста (без обязательного условия их размножения)
ГОСТ Р ИСО 11133-1-2008
Указанные среды не предназначены для размножения микроорганизмов, а, следовательно, не должны содержать питательных веществ. Их наличие может отрицательно сказаться на качестве среды, поскольку будет способствовать размножению сопутствующей (не целевой) микрофлоры). Не все транспортные среды перечисленные ниже отвечают этим требованиям.
Транспортная среда Stuart
Транспортная среда Amies
Молочно-триптозно-глюкозо-глицериновая транспортная среда (STGG)
Тиогликолевая транспортная среда
Солевая транспортная среда для Vibrio spp.
Яичная среда Dorset
Коммерческие транспортные системы
В настоящее время все, наиболее широко распространенные транспортные среды выпускаются ведущими производителями микробиологической продукции. Данная продукция включает:
Сухие дегидратированные транспортные среды, предназначенные для приготовления в лаборатории.
Готовые к применению транспортные среды
Транспортные системы, представляющие собой пробирку (контейнер) и тампон или другое устройство для взятия материала
Транспортная среда: Культуральная среда, предназначенная для сохранения и поддержания жизнеспособности микроорганизмов с момента отбора образца до начала ее анализа в лаборатории.
Инструкция по применению транспортной среды Эймса.
Транспортная полужидкая среда Эймса предназначена для сохранения жизнеспособности широкого круга бактерий, в том числе требовательных, с момента забора материала для посева до начала микробиологического исследования. Среда предупреждает гибель микробных клеток, сохраняет их жизнеспособность, но, в то же время, препятствует размножению микроорганизмов, что исключает или существенно ограничивает преимущественный рост менее требовательных микроорганизмов при ассоциативной микрофлоре субстрата.
Среда Эймса выпускается в двух вариантах: с добавлением угля и без него. Активированный уголь сорбирует метаболиты, угнетающие жизнеспособность высокочувствительных патогенных микроорганизмов (в частности, гонококков).
В герметично укупоренных флаконах (по 200 и 400 мл) и в виде транспортных систем (по 5 мл на пробирку).
ПОДГОТОВКА СРЕДЫ К ИСПОЛЬЗОВАНИЮ:
С соблюдением правил асептики снять с флакона со средой алюминиевый колпачок и заменить резиновую пробку на стерильную ватно-марлевую. На водяной бане разогреть флакон со средой до её полного расплавления (не кипятить!). Извлечь флакон из водяной бани и частично остудить при комнатной температуре в течение 10-15 минут. Стерильно над пламенем горелки разлить транспортную среду в пробирки по 6-10 мл. Объем среды в пробирках определяется техников посева: при посеве мазка, взятого тампоном на тампонодержателе, достаточен небольшой столбик среды (6 мл). При прямом посеве биоматериала (без тампона) объем среды в пробирке увеличивают.
ПОСЕВ И ТРАНСПОРТИРОВКА:
Биологический материал погружают в столбик среды таким образом, чтобы он не оставался на ее поверхности. После этого пробирка с засеянной средой направляется в микробиологическую лабораторию в закрытом контейнере. Если транспортировка непосредственно после взятия материала невозможна, пробирки со средой необходимо поместить в рефрижератор (+2 +8 °С) или в прохладное, защищенное от теплового воздействия место. Среда Эймса сохраняет жизнеспособность требовательных аэробных и факультативно анаэробных бактерий около суток, после чего отмечается постепенная гибель клеток. Поэтому пересев с транспортной среды на обогащенные дифференциально-диагностические и другие общепринятые среды целесообразно проводить в минимальные сроки.
УСЛОВИЯ И СРОК ХРАНЕНИЯ:
Хранить в прохладном, защищённом от действия солнечных лучей месте.
Что такое среда эймса
О компании
Как была создана транспортная среда Эймса (AMIES)
Транспортные среды широко используются в лабораторной практике. Они дают возможность получить надежные результаты даже в условиях длительного хранения и транспортировки биопроб. Для понимания принципов работы широкоизвестной транспортной среды Эймса (Amies) мы предлагаем Вам ознакомиться с ее физико-химическими характеристиками.
Правильный забор и транспортировка микроорганизмов критично важны для их восстановления и определения в культуре при последующем посеве. Если патогенные микробы погибают на преаналитическом этапе исследований, достоверность анализов падает, что сильно искажает их результаты. Для поддержания жизнеспособности чувствительных микроорганизмов (например, рода Neisseria) после их забора до лаборатории Стюартом была разработана одноименная транспортная питательная среда. После ее модификации Эймсом этот состав стал одним из самых широко используемых сегодня.
Классическая формула Стюарта
Модифицированный состав Эймса
Главное отличие среды Эймса от оригинальной среды Стюарта состоит в том, что глицерофосфат был заменен неорганическим фосфатным буфером. Из-за того, что колиформные организмы и некоторые другие грамотрицательные палочки метаболизируют глицерофосфат в среде Стюарта, их количество в бакпосевах из ран, горла, фекальных образцов увеличивалось, что искажало количественные результаты анализов.
Также Эймсом было показано, что для поддержки жизнеспособности штаммов Neisseria gonorrhoeae концентрация NaCl 0,3 г/л является оптимальной. Ионы Са2+ и Mg2+ были добавлены в состав среды, так как считается, что они регулируют проницаемость клеточной стенки бактерий и таким образом влияют на их выживаемость.
Стюарт обнаружил, что выживаемость Neisseria gonorrhoeae резко увеличивалась при взятии мазков палочками с углем. Проблема была в том, что из-за черной угольной пыли они не пользовались популярностью среди пациентов. Эймс предложил оригинальное решение: добавитьактивированныйуголь непосредственно в транспортную среду.
Выживаемость N. gonorrhoeae при 22°C [1] вне среды:
85 штаммов
Как была создана транспортная среда Эймса (AMIES)
Транспортные среды широко используются в лабораторной практике. Они дают возможность получить надежные результаты даже в условиях длительного хранения и транспортировки биопроб. Для понимания принципов работы широкоизвестной транспортной среды Эймса (Amies) мы предлагаем Вам ознакомиться с ее физико-химическими характеристиками.
Правильный забор и транспортировка микроорганизмов критично важны для их восстановления и определения в культуре при последующем посеве. Если патогенные микробы погибают на преаналитическом этапе исследований, достоверность анализов падает, что сильно искажает их результаты. Для поддержания жизнеспособности чувствительных микроорганизмов (например, рода Neisseria) после их забора до лаборатории Стюартом была разработана одноименная транспортная питательная среда. После ее модификации Эймсом этот состав стал одним из самых широко используемых сегодня.
Классическая формула Стюарта
Модифицированный состав Эймса
Главное отличие среды Эймса от оригинальной среды Стюарта состоит в том, что глицерофосфат был заменен неорганическим фосфатным буфером. Из-за того, что колиформные организмы и некоторые другие грамотрицательные палочки метаболизируют глицерофосфат в среде Стюарта, их количество в бакпосевах из ран, горла, фекальных образцов увеличивалось, что искажало количественные результаты анализов.
Также Эймсом было показано, что для поддержки жизнеспособности штаммов Neisseria gonorrhoeae концентрация NaCl 0,3 г/л является оптимальной. Ионы Са2+ и Mg2+ были добавлены в состав среды, так как считается, что они регулируют проницаемость клеточной стенки бактерий и таким образом влияют на их выживаемость.
Стюарт обнаружил, что выживаемость Neisseria gonorrhoeae резко увеличивалась при взятии мазков палочками с углем. Проблема была в том, что из-за черной угольной пыли они не пользовались популярностью среди пациентов. Эймс предложил оригинальное решение: добавить активированный уголь непосредственно в транспортную среду.
Выживаемость N. gonorrhoeae при 22°C [1] вне среды:
85 штаммов
С углем
Без угля
Время
К-во выживших штаммов
К-во выживших штаммов
и в транспортных средах:
100 штаммов
Среда Стюарта
Среда Amies
Time
К-во выживших штаммов
К-во выживших штаммов
Активированный уголь благодаря большой удельной поверхности обладает высокой адсорбционной способностью. Таким образом, роль угля в высокой выживаемости бактерий в среде Эймса состоит в адсорбции молекул веществ, токсичных для микроорганизмов.
Концентрация агара в среде Эймса была немного увеличена по сравнению с классической формулой среды Стюарта, поскольку присутствие частиц угля негативно влияло на гелеобразующие свойства агара. Также из-за наличия угля Эймс убрал из оригинального состава транспортной среды метиленовый синий, который раньше использовался в качестве редокс-индикатора.
В итоге, во многих исследованиях было показано высокую эффективность использования транспортной среды Стюарта с модификациями Эймса для поддержания даже таких прихотливых микроорганизмов как Haemophilus influenzae, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes and Corynebacterium diphtheriae [2, 3].
Сегодня на украинском рынке выбор транспортных сред достаточно широкий. Мы предлагаем Вам серию заметок, которые помогут Вам лучше разобраться в особенностях их состава и применения. Если же у Вас возникают вопросы, касающиеся использования транспортных сред, квалифицированные специалисты компании Sente-Lab будут рады Вам помочь.
1. Amies C. R. A modified formula for the preparation of Stuart’s transport medium //Canadian Journal of Public Health/Revue Canadienne de Sante’e Publique. – 1967. – P. 296-300.
2.Barry A. L., Fay G. D., Sauer R. L. Efficiency of a transport medium for the recovery of aerobic and anaerobic bacteria from applicator swabs //Applied microbiology. – 1972. – Vol. 24. – №. 1. – P. 31-33.
3.Bartlett J. G. et al. Anaerobes survive in clinical specimens despite delayed processing //Journal of clinical microbiology. – 1976. – Vol.. 3. – №. 2. – P. 133-136.
Транспортная среда Эймса с древесным углем
Amies Transport Medium w/Charcoal
Фасовка 500 г. Срок годности 4 года.
Хранить при температуре 20°С
Среда для транспортировки и сохранения микробиологических проб; рекомендуется для мазков из горла, влагалища и ран, а также для выживания Neisseria gonorrhoeae
Формула в граммах на литр
Активированный уголь 10,0 Хлорид натрия 3,0
Na2HPO4 1,1 Тиогликолят натрия 1,0
Хлорид калия 0,2 KH2PO4 0,2
Хлорид кальция 0,1 Хлорид магния 0,1
Бактериологический агар № 2 7,5
Конечная величина pH 7,3 ± 0,2 при 25°C
Развести 23,2 г среды в 1 литре дистиллированной воды. Тщательно перемешать и нагреть. Часто помешивая, довести до кипения. Кипятить в течение минуты до полного растворения. Разлить в пробирки и стерилизовать 15 минут при 121°C. Поддерживать гомогенное распределение угля по всей среде, переворачивая пробирки по мере их остывания. Готовая среда должна быть черного цвета и храниться при 2–8°C.
Транспортная среда Эймса с древесным углем используется для сбора, транспортировки и сохранения микробиологических образцов. Ее состав рассчитан на поддержание жизнеспособности микроорганизмов без существенного увеличения роста. Среда не является питательной, содержит фосфатный буфер, полужидкая.
Эймс (Amies, 1967) разработал транспортную среду с углем после того, как доказал, что коэффициент выживания N. gonorrhoeae увеличивается при использовании угольных тампонов. Эймс решил проблему удаления угля из тампонов, включив уголь в состав среды. Транспортная среда Эймса рекомендуется для мазков из горла, влагалища и ран.
Древесный уголь, входящий в состав среды, нейтрализует жирные кислоты, токсичные для микроорганизмов. Хлоридные соли поддерживают осмотический баланс, фосфаты выступают в качестве буферной системы; тиогликолят натрия подавляет окислительные процессы и поддерживает восстановительные условия среды.
Поместить инокулированные стерильные тампоны в верхнюю треть транспортной среды в транспортировочном контейнере; отломить выступающую часть стрежня тампона и плотно завинтить крышку. Отправить в лабораторию в течение 24 часов для анализа культуры. До отправки образцы можно хранить в холодильнике.
Следующие результаты были получены при использовании среды на тестовых культурах, хранившихся при различных температурах (4°C и комнатная температура) до 72 часов.
Код исследования: 1956
740 руб.
Посев на флору с определением чувствительности к антибиотикам.
Нормальная микрофлора человека представляет собой совокупность микроорганизмов, населяющих кожу и слизистые оболочки человека. Наибольшее их количество (около 40 %) обитает в желудочно-кишечном тракте, остальная часть – на кожных покровах, зеве, глотке, в мочеполовой системе и др. Нормальная микрофлора подразделяется на постоянную (составляет до 90 % присутствующих в организме микробов), факультативную (менее 10 %) и случайную (не более 0,5 %).
По способности вызывать инфекционные заболевания микроорганизмы классифицируют на непатогенные (не вызывающие заболевания), условно-патогенные (в норме могут выделяться в небольших количествах и при определенных условиях активно размножаются, приводя к воспалению) и патогенные (являются возбудителями инфекционных заболеваний и в составе нормальной микрофлоры не обнаруживаются).
Бактериологическое исследование (посев на флору) позволяет определить качественный и количественный состав микрофлоры исследуемого клинического материала, в том числе выявить патогенные микроорганизмы. При обнаружении условно-патогенных микроорганизмов в высоком титре или патогенных микроорганизмов определяется их чувствительность к антимикробным препаратам (антибиотикам).
В результате указывается:
наличие или отсутствие роста возбудителя;
количество бактерий, выраженное в КОЕ/мл;
чувствительность к антимикробным препаратам (определяется при титре более 10*4 кое/мл).
Взятие биоматериала из зева:
Взятие материала осуществляется утром, натощак. Перед манипуляцией не следует есть, пить, чистить зубы, полоскать рот, курить и т.п. За 10-14 дней необходимо исключить применение растворов, спреев для горла, содержащих противомикробные средства или антибиотики. Взятие материала у детей на грудном вскармливании проводится перед кормлением.
Взятие биоматериала из носа:
За 10-14 дней необходимо исключить применение растворов, спреев, мазей для носа, содержащих противомикробные средства или антибиотики.
Взятие биоматериала из ушей:
Не рекомендуется мыть и чистить уши ватными палочками. За 10-14 дней рекомендовано не использовать ушные капли, содержащие противомикробные средства или антибиотики.
Сбор мокроты осуществляют утром до приема пищи.
Перед сбором необходимо почистить зубы и прополоскать рот кипяченой водой.
Через 30 минут после чистки зубов мокрота собирается в стерильный контейнер.
Во время сбора необходимо исключить попадание в контейнер слюны и носоглоточной слизи.
Контейнер с мокротой необходимо доставить в лабораторию в течение 2 ч.
Сбор грудного молока:
Для сбора грудного молока необходимы два стерильных контейнера – отдельный для каждой груди.
Их нужно подписать, чтобы было понятно, в какой находится проба из левой груди, а в какой – из правой.
Непосредственно перед сбором молока руки и грудь нужно как следует вымыть с мылом.
Кроме того, область ареол рекомендуется обработать или 70% спиртом, или спиртовыми салфетками! На каждую грудь по отдельной салфетке.
Затем нужно первую порцию молока из каждой груди сцедить в раковину, а вторую (около 5-10 мл) в заранее приготовленную емкость.
Пробы грудного молока необходимо доставить в лабораторию для диагностики в течение двух часов с момента сбора.