Что такое эуглобулиновый лизис
Фибринолиз эуглобулиновый
Краткое описание
Подробное описание
Время лизиса эуглобулиновых сгустков (унифицированный метод) (метод Ковальского, Копека и Ниверовского)
Принцип: Метод основан на осаждении в кислой среде и при низкой температуре эуглобулиновой фракции, содержащей факторы свертывания и фибринолиза. Главным компонентом эуглобулиновой фракции является плазминоген, кроме того, в ней содержится около 25% фибриногена, протромбин и другие факторы свертывающей системы крови. Полученный осадок эуглобулинов растворяется. Фибриноген превращается в фибрин. Время от момента образования сгустка фибрина до его растворения выражает фибринолитическую активность крови.
Реактивы: 1. 0,1 М раствор оксалата аммония или щавелевокислого натрия; 2. Раствор борнокислого натрия (9,0 г NaCI и 1,0 г Na2B4O7 растворяют в 1 л дистиллированной воды); 3. Кислая вода: 1 мл 1 % раствора уксусной кислоты и 90 мл дистиллированной воды. 4. 0,025 М раствор СаСl2.
Ход определения. 0,1 мл плазмы переносят в центрифужную пробирку и добавляют 1,8 мл кислой воды. При этом из плазмы выпадает эуглобулиновая фракция белка. Содержимое пробирки осторожно перемешивают и помещают пробирку в холодильник при + 4°С. Через 20 минут центрифугируют в течение 10 минут при 2000 об./мин. Надосадочную жидкость отсасывают. К осадку приливают 0,1 мл борнокислого натрия и ставят в термостат при 37°С на несколько минут до полного растворения. Приливают 0,1 мл CaCl2. Отмечают момент образования сгустка и вновь ставят в термостат до полного лизиса.
Унифицированный метод определения фибринолитической активности методом лизиса эуглобулинов плазмы (по Е. Kowalski et al., 1959).
Принцип: Время растворения сгустка, установленное по лизису эуглобулиновой фракции, отражает фибринолитическую активность плазмы, освобожденной от ингибиторов.
Реагенты и оборудование: 1. 1,42 % раствор оксалата аммония или 1,34 % раствор оксалата натрия; 2. 1 % раствор уксусной кислоты; 3. боратный раствор (9 г хлорида натрия и 1 г бората натрия, которые растворяют в 1000 мл дистиллированной воды. Боратный раствор и раствор уксусной кислоты лучше хранить при 4°C до 6 мес); 4. 0,025 М раствор хлорида кальция; 5. водяная баня на 37 °С.
Ход определения: Кровь, взятую из вены, смешивают с антикоагулянтом в соотношении 9:1 и до центрифугирования хранят в бане со льдом. Центрифугируют 10 мин при 1500 об/мин. В пробирку наливают 0,5 мл плазмы и 8 мл дистиллированной воды, смешивают их и добавляют 0,15 мл 1 % раствора уксусной кислоты (рН смеси должен быть 5,3). Пробирку оставляют на 30 мин при +4 °С. Затем смесь центрифугируют со скоростью 1500 об/мин 5 мин, сливают надосадочную жидкость и удаляют остатки жидкости, опрокинув пробирку на фильтровальную бумагу. Осадок эуглобулинов растворяют в 0,5 мл боратного раствора. Две пробы раствора по 0,2 мл переносят в пробирки диаметром 10 мм и опускают в баню при 37 °С. Через 1 мин к каждой пробе добавляют по 0,2 мл раствора хлорида кальция. Через несколько минут образуется сгусток. Время окончания лизиса определяют по полному исчезновению (растворению) сгустка.
Нормальные величины: 183—263 мин.
Оценка результатов и замечания по методу: Если уменьшен фибри-нолитический потенциал плазмы (вследствие нарушения активации плазми-ногена из-за недостатка его активаторов, замедления калликреин-кининовой активации, ингибиции фактора ХПа, уменьшения количества плазмино-гена), эуглобулиновый лизис продолжается более 300 мин. Такое явление наблюдается у больных тромбозами, с предтромботическими состояниями, III—IV стадиями ДВС-синдрома, у страдающих геморрагическим васкули-том, сепсисом, токсикозами беременности. Замедление лизиса считают признаком предтромбоза, который отражает состояние гиперкоагуляции или способствует его развитию.
При повышении плазминового потенциала лизис эуглобулинов ускорен (продолжается менее 150 мин), когда активируется плазминоген вследствие увеличения как экзогенных (стрептококкокиназа, стафилококкокиназа, уро-киназа, трипсинемия и др.), так и эндогенных (активаторы тканей, фактор ХПа, кинин, калликреин) активаторов. Степень активации плазмина, как правило, отражает или интенсивность внутрисосудистого свертывания и защитную реакцию организма на угрозу образования тромбов (вторичный фибринолиз), или самостоятельное включение плазминовой системы ее активаторами в патологический процесс (первичный фибринолиз). Первичный фибринолиз играет роль в развитии некоторых геморрагических состояний у пациентов акушерских, хирургических, урологических отделений. Поэтому он корригируется антифибринолитическими препаратами (ЭАКК, трасилолом, контрикалом, гордоксом и др.). Между тем больным со вторичным фибринолизом эти препараты, как правило, противопоказаны, у них фибринолиз нормализуется после введения гепарина.
Нормальный замедленный или ускоренный эуглобулиновый лизис отражает активный потенциал плазминовой системы. Однако заключение о состоянии плазминовой системы в целом и ее роли в развитии геморрагий и тромбообразования невозможно, если не получены данные исследования спонтанного фибринолиза и активности ингибиторов плазмина, сопоставленные с клиническими данными больного.
Лизис эуглобулиновой фракции плазмы необходимо определять в пределах 1—2 ч после взятия крови.
Нужно очень тщательно удалять надосадочную жидкость со стенок пробирки: сразу же после сливания надосадочной жидкости стенки пробирки осушить свернутой в трубочку фильтровальной бумагой, не дотрагиваясь до осадка эуглобулинов, и еще раз “снять” остатки надосадочной жидкости другой фильтровальной бумагой, смоченной в дистиллированной воде. В надосадочной жидкости много ингибиторов плазминовой системы, поэтому ее незначительные капельки на стенках пробирки резко удлиняют лизис сгустка, искажая данные исследования.
После образования сгустка пробирку нельзя встряхивать, так как иногда после незначительного встряхивания сгусток ретрагирует и резко удлиняется его лизис.
Эуглобулиновыи лизис на 35—45 мин протекает быстрее в суховоздуш-ном термостате, чем в водяной бане. Поэтому контрольные исследования у здоровых и у больных должны проводиться в одинаковых условиях.
Эуглобулиновыи лизис можно значительно ускорить, добавив в систему активаторов фибринолиза (стрептокиназу, урокиназу и др.) или предварительно обработав плазму каолином.
Разведенную эуглобулиновую фракцию можно переносить на фибриновые пластины для оценки интенсивности лизиса по площади лизируемого фибрина.
Фибриноген в крови
Фибриноген в крови – один из ключевых показателей свертываемости крови, который определяют в ходе коагулологического исследования (коагулограммы или гемостазиограммы). Данный анализ назначают всем будущим мамам в плановом порядке, обычно один раз в триместр, по показаниям – чаще.
В этой статье мы расскажем о том, что такое анализ на фибриноген крови, какие нарушения он помогает выявить, и почему его важно сдавать во время беременности.
Что такое фибриноген?
Фибриноген синтезируется клетками печени и постоянно присутствует в крови в определенной концентрации. При повреждении стенки сосудов он, с помощью фермента тромбина, превращается в фибрин, который образует полимеры в виде нитей белого цвета – они входят в состав кровяного сгустка. Изменение концентрации фибриногена в крови грозит кровотечениями или тромбозами.
Во время беременности через сосуды плаценты ежеминутно проходит около 600 мл крови. После того как плацента отделяется и выходит во время родов, на слизистой оболочке матки остается кровоточащая поверхность. Во время родов женщина теряет около 500 мл крови (во время кесарева сечения вдвое больше – в среднем 1000 мл). Но затем матка сокращается, сосуды сжимаются, и кровотечение останавливается. Очень важно, чтобы при этом был баланс в работе свертывающей и противосвертывающей систем крови.
Во время беременности под действием гормонов свертывающая система крови активизируется. Организм как бы «готовится» к тому, чтобы в ответственный момент справиться с физиологической кровопотерей.
Уровень фибриногена в крови будущей мамы постепенно повышается и в третьем триместре увеличивается в 2–3 раза по сравнению с обычными значениями. Это происходит под влиянием гормонов.
Нормы фибриногена в крови у женщин
Итак, мы разобрались, что гиперкоагуляция (повышенная свертываемость крови) у будущих мам – нормальное явление. Но чрезмерная активизация свертывающей и ослабление работы противосвертывающей системы может привести к осложнениям: остановке развития беременности на любом сроке, гестозу и фето-плацентарной недостаточности, следствием которых может стать рождение маловесных, нездоровых детей. Не стоит забывать и о маме. Нарушение баланса между свертывающей и противосвертывающей системами может спровоцировать осложнения послеродового периода: тромбозы, кровотечения. Самое серьезное – ДВС-синдром.
Во время беременности в пять раз повышается риск опасного состояния – тромбоза глубоких вен.
Вероятность тромбоза повышается, если женщина ведет малоподвижный образ жизни (поэтому будущим мамам на любом сроке нужна физическая активность – если беременность протекает без осложнений), страдает ожирением, курит, если будущей маме больше 40 лет, если у нее установлены искусственные клапаны сердца, при аутоиммунных состояниях: системной красной волчанке, антифосфолипидном синдроме, хроническом аутоиммунном тиреоидите. В группе риска тромбоза мелких и крупных сосудов беременные с генетической или приобретенной тромбофилией.
Уровень фибриногена после родов постепенно снижается, а после кесарева сечения – на некоторое время повышается.
Серьезная гиперкоагуляция во время беременности приводит к таким осложнениям, как тромбоз сосудов плаценты, преэклампсия, задержка внутриутробного развития, повторные выкидыши.
Тромбоз глубоких вен и тромбоэмболия легочной артерии – одна из основных причин материнской смертности.
Некоторые гормональные препараты (содержащие гормоны эстрогены) могут увеличивать этот риск. Поэтому всем женщинам, получающим комбинированную гормонотерапию (комбинированная гормональная контрацепция, циклическая гормонотерапия, менопаузальная гормонотерапия) очень важно регулярно (1 раз в 6-12 месяцев, исходя из клинико-анамнестических данных) сдавать кровь на фибриноген и другие показатели работы свертывающей и противосвертывающей систем крови.
КАК ПРОВОДЯТ АНАЛИЗ?
Уровень фибриногена в крови оценивают во время коагулограммы, вместе с другими показателями свертываемости : свободным протеином S, фактором VIII, протеином C, плазминогеном, волчаночным антикоагулянтом, антитромбином III, D-димером, протромбином, тромбиновым временем, АЧТВ, МНО. Важно оценить основные показатели гемограммы (эритроциты, гемоглобин, лейкоциты и тромбоциты).
Для исследования берут небольшое количество крови из вены.
Как правильно подготовиться к обследованию
При каких состояниях изменяется уровень фибриногена?
Показатели фибриногена в крови возрастают при воспалительных процессах, повреждении и гибели тканей. Снижение происходит при нарушении синтеза и серьезных кровотечениях, когда истощаются резервы свертывающей системы крови. Само по себе изменение уровня фибриногена не поможет установить точный диагноз, оно лишь сигнализирует о том, что в организме не все в порядке.
